摘要:从山东荣成养鱼场发病牙鲆分离到一株病原菌M3，革兰氏阴性，杆状，能运动，菌落半透明，用BIOLOG细菌鉴定系统不能鉴定。通过16S rDNA序列分析和同源性检索发现M3菌株与弧菌属的同源性较高，为94%～98%。系统发育学分析表明菌株M3与鳗弧菌关系最近，相似性为996%，其生化性状也和鳗弧菌的特征相似，故可把M3定为鳗弧菌(Vibrio anguillarum)。

摘要:1998～2000年，从大同、太原和内蒙古自治区等地采集健康块茎中分离到133株内生细菌，通过离体抑菌作用测定、田间和温室实验，初步筛选出5个具有促生或潜在防治马铃薯环腐病的内生细菌，其中118菌株定殖、促生和拮抗三种作用兼备，具有很好的开发应用前景。

摘要:将结核分枝杆菌H37RV株在苏通培养基内，37℃培养21d,然后将培养物分成上清液(A)、细胞浆(B)和细胞膜?蛋白质样品。以pH3.0～10.0的IPG预制胶条等电聚焦电泳为第一向，SDSPAGE为第二向进行双向电泳(2DE)、银染。经扫描、计算机处理。A组份的部分蛋白质斑点采用质谱仪进行蛋白质鉴定。A、B和C 3个组份蛋白质斑点总数分别为907、884和681；3个组份蛋白质分子量分布基本相似，约70.5%～74.4%在10～49kD之间；蛋白质等电点(pH)A、B两组份分布基本相似，约80.9%～83.5%在pH3.0～6.4之间，而C组份pH7.6～10.0之间的蛋白质斑点数比A和B两组分略多；A、B和C 3个组份表达丰度较高的蛋白质斑点数占各组蛋白质斑点总数的比例分别为7.8%、27.4%和2.8%，蛋白质等电点90.0%均分布在pH3.0～6.4范围内。B组份蛋白质分子质量73.1%分布在10～49kD之间，比A、B两组份略高。A组份14个蛋白质斑点经肽质量指纹谱分析，其中，9个点有同源性的或推测的蛋白质功能，5个蛋白质功能不清楚。总之，初步获得了结核分枝杆菌H37RV株在上述体外培养条件下收获的培养物的上清液、细胞浆、细胞膜蛋白质组2DE图谱及其特点，为该菌功能基因组研究提供蛋白质组信息。

摘要:从伪狂犬病毒(PRV)国内地方分离Ea株基因组DNA片段中克隆了完整的gI基因，序列分析结果表明，gI基因编码区全长1101bp,可编码366个氨基酸残基，二级结构预测具有典型I型膜蛋白特征。与GenBank中收录的国外Rice株的同源比较发现，Ea株gI在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处突变，尤其是潜在胞浆区中连续两个碱基的缺失导致移码突变，致使gI基因的读码框架后移，从而导致Ea株gI较rice株长16个氨基酸残基。将gI基因克隆到真核表达载体pcDNA31+中的人巨细胞病毒早期启动子下游，构建的真核表达质粒转染PK15细胞，间接免疫荧光检测证实gI获得正确表达。进一步测定天然缺失gI的PRV弱毒Bartha株在表达gI细胞系和空白载体转染的对照细胞系中的蚀斑形成单位(pfu)和组织细胞培养半数感染量(TCID50)，结果显示：Bartha株在表达gI细胞系中的pfu和TCID\-\{50\}分别为对照细胞系的164%和200%。说明gI具有促进病毒增殖的功能。

摘要:为从分子水平掌握我国H9亚型AIV的遗传变异情况和流行规律，本研究汇集近年来从我国12个省、市、自治区的发病鸡群中分离到的23株H9亚型禽流感病毒，通过RT-PCR方法和核苷酸序列测定获得了23个毒株的HA基因cDNA核苷酸序列。核苷酸和推导的氨基酸序列同源性比较结果表明，这些毒株HA基因的核苷酸序列同源性为94．1％～100％，氨基酸序列同源性为95．4％～100%；将这23个毒株和来自亚洲及世界其它地区的另外31株的HA基因cDNA序列同源性进行比较发现，分离自香港的HK170499株与日本的2个毒株关系较近；氨基酸序列分析发现，CKGS199、CKTJ196、CKTJ296、CKSH300和CKBJ197五个毒株各发生了一个潜在的糖基化位点的丢失。54株H9亚型AIVHA基因55bp～1152bp的氨基酸序列分析发现，裂解位点尽管有10种基序，但本研究中的23株和近年来从我国大陆和香港地区的分离的毒株则均为RSSR↓GLF；构成受体结合位点的191位氨基酸有一个规律，即所有中国大陆毒株与部分香港毒株都为N，其它毒株均为H，141aa～143aa处的糖基化位点有与191aa类似的规律，即：凡是191aa为N的毒株，该处均为NVS（CKBJ194除外），凡是191aa为H的毒株，则该处均为NVT；遗传发生关系分析，中国大陆毒株处于欧亚谱系的第一支。本研究结果表明近年来我国鸡群中H9N2亚型禽流感病毒的感染流行可能有一个共同的来源，这为制定防治该亚型禽流感流行的有效对策提供了重要的科学依据。

摘要:丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶在病毒复制和包装中的重要作用使其成为特异性抗病毒药物研究的首选靶标。根据丝氨酸蛋白酶晶体结构特点，用柔性连接子连接NS3丝氨酸蛋白酶结构域和NS4A的核心序列，构建成单链丝氨酸蛋白酶基因并且在大肠杆菌中获得高水平的可溶性表达，纯化后的目的蛋白能够切割重组蛋白底物NS5ab。随后，以单链丝氨酸蛋白酶为靶分子对噬菌体展示的随机十二肽库进行了三轮淘筛，挑选的44个克隆中有37个克隆能够特异性地结合丝氨酸蛋白酶，并且这种结合作用为竞争性ELISA试验结果所支持。对13个克隆进行序列测定，得到6种序列，它们在氨基酸组成上存在明显偏性，富含组氨酸和色氨酸，缺乏酸性氨基酸；6种序列存在一个共有序列。

摘要:分别用质粒pJJ699与pUC19(vhb)，pIJ702与pBR322(vhb)，构建大肠杆菌链霉菌穿梭质粒，将透明颤菌血红蛋白基因转入金色链霉菌。在低溶解氧浓度下，透明颤菌血红蛋白的表达，可提高金色链霉菌氧的利用效率，产物合成比原始菌株提高40%～60%。在局部低氧的环境中，采用四环素抗性基因启动子带动血红蛋白基因表达，可有效发挥透明颤菌血红蛋白的氧传递效率，优于透明颤菌血红蛋白基因受溶解氧调控的天然启动子。

摘要:从人外周血中分离出白细胞，提取其总RNA，根据文献报道的IL1β的核苷酸序列合成5′和3′端引物，用RTPCR的方法获得了IL1β的基因cDNA,并在大肠杆菌中获得了高效表达，表达量占全菌的40%，并对表达产物进行了分离纯化和活性分析，获得了纯度大于98%的样品，该样品表现出明显的生物学活性。

摘要:FruB是与粘细菌(Myxococcus xanthus)发育特异性转录因子FruA具有亲和力的蛋白因子，协同FruA参与对靶基因的调控。根据FruB氨基端氨基酸序列，设计简并性寡核苷酸引物对染色体DNA进行PCR扩增，以扩增产物为探针自粘细菌小型基因文库筛选出同源的4.5kb SacI阳性片段。fruB基因阻断分析表明，fruB功能缺失延缓子实体发育并降低粘孢子产率，提示fruB与粘细菌发育分化有一定联系。

摘要:筛选出一株产菊粉酶酶源菌株AF10，鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。PCR扩增AF10的内切菊粉酶基因inuA1并进行核苷酸序列分析。结果表明inuA1全长1551bp，没有内含子，所编码的氨基酸序列中，存在4个潜在的N糖基化位点，其中存在菊粉酶的保守序列WMNEPN。以pUC118为克隆载体，以E.coli JM109为受体菌株，获得菌粉酶基因克隆。

摘要:为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点，采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离，并测定插入位点相邻DNA序列，获得了三个转座子插入位点DNA序列，其中一个是柠檬酸合成酶基因，另两个为目前未知基因，暂命名为orfA和orfB。该方法简便易行，是分析转座子插入位点的理想方法。

摘要:应用噬菌体随机展示肽库和硫氧还蛋白表面展示技术，建立了在表位水平研究病毒流行病学的方法，并以丙型肝炎病毒核心区蛋白做了初步验证，证明该方法高效可行。

摘要:苏云金芽胞杆菌鲇泽亚种菌株HD\|133含有代表性的三种cry1类基因cry1Ab，cry1C和cry1D，它们的表达量却明显不同。通过Northern杂交检测了菌株HD\|133中基因cry1D和cry1Ab的mRNA含量及其稳定性。结果表明：基因cry1D mRNA的形成比基因cry1Ab的mRNA滞后3h，且基因cry1D形成mRNA的量很低，产生过程很平稳，在芽胞形成中期比cry1Ab mRNA低37倍；cry1Ab mRNA含量在芽胞形成前期高于后期，在后期仍能大量持续稳定地转录。cry1D mRNA的半衰期为18min，而cry1Ab mRNA的半衰期为14min。尽管cry1D mRNA比cry1Ab mRNA的半衰期更长，但cry1D和cry1Ab转录时间和转录量的差异是导致其表达量差异的重要原因。

摘要:理化因素致细胞DNA损伤，彗星测试提供了一个直观的方法。采用新型SCGE图象分析系统(IMI10)，将细胞显微分光光度分析与显微成像及图象分析结合，直接检测柠檬醛致黄曲霉核DNA损伤，与国际流行的SCGE图象分析系统相比，具有分析速度快、便于分析，同时具有中英文可切换界面和多格式输出打印特点。该系统使彗星试验的检测时间缩短2/3，并提高了准确性，可实现对活细胞多种结构参数、细胞内分子与膜的变化状况同时进行长时间连续的动态瞬间监测，具有广阔应用前景。

摘要:将产热稳定性过氧化氢酶的重组大肠杆菌培养后菌体破碎得到的粗酶液经热处理、硫酸铵分级沉淀、DEAE\|Sephadex A\|50离子交换层析、HiPrep16/10 Phenyl疏水作用层析、Superdex200 HR 10/30凝胶层析提纯后得到电泳纯的酶，比酶活达到15629U/mg。此酶的最适温度为70℃，最适pH70，在60℃保温60min酶活力基本不变，在pH3～8的范围内比较稳定。此酶的Km和Vmax分别为775mmol/L和278mmol\5min\+\{-1\}·mg-1。1mmol/L的Zn2+、Ba2+、Mn2+可使该酶完全失活，KCN、NaN\-3、Na\-2S\-2O\-4、巯基乙醇对酶活力有抑制作用，50mmol/L的EDTA不影响酶活性。

摘要:从PBCV\|1感染小球藻NC64A的细胞裂解液中提取了Lysin的粗制剂，酶活底物范围分析表明，几丁质酶、壳聚糖酶和β\|1,3\|葡萄糖苷酶是Lysin活性的主要组成部分，并与小球藻细胞壁的组成成分相吻合。其中几丁酯酶和壳聚糖酶，特别是几丁酯酶在裂解小球藻细胞壁的过程中发挥了重要的作用。Lysin粗制剂经FPLC分离纯化得到分子量分别为52kD、56kD的两个几丁质酶(Chil和Chi2)和一个分子量为36kD的壳聚糖酶。

摘要:在二元酸发酵过程中流加H2O2对热带假丝酵母发酵生产二元酸有明显的促进作用，2mmol/L的H2O2对产酸的促进作用最为明显，比对照提高了26%。对细胞色素P450酶的分析表明，流加H2O2对细胞色素P450酶的活性有明显的促进作用，并且细胞色素P450酶的活性跟产酸成正相关。此外，还进一步分析了流加H2O2对产酸的促进机理。

摘要:对白腐真菌(Coriolus vericolor)产生漆酶进行〖JP2〗了研究。发现该菌产漆酶的最适初始pH值为45。提高微量元素浓度或添加藜芦醇都可使C.versicolor的产酶能力增加，添加Tween80会有一定的抑制作用。采用C.versicolor菌丝球进行重复分批产酶试验，结果表明菌丝球的稳定性很好，同一批菌丝球可连续利用14次，平均每批酶活力可保持在672U/mL，产酶能力优于聚氨酯泡沫固定化菌丝。将粗酶液用于染料的脱色降解试验，在酶活力为3.3IU/mL〖JP〗，酸性橙浓度为500mg/L条件下，经过24h反应，脱色率达到98.5%；对含弱酸大红和卡布龙红的印染废水进行脱色试验，脱色率也达到了93%。

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