摘要:从北京地区公园湖岸土壤中分离到一株橙红色杆状耐辐射菌，细胞壁革兰氏染色为阴性，电镜显示菌体大小为06μm～16μm，略大于日本学者报道的Deinobacter grandis菌，过氧化氢酶的含量和分子量不同于D.radiodurans R1菌,分离菌的(G+C)mol%含量为707%, 16S rDNA序列分析表明，分离到的杆状耐辐射菌(RR5332)16S rRNA基因序列与Deinobacter grandis菌高度同源，提示RR5332归于Deinobacter菌属，并可能是该菌属中的一个新种。

摘要:从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子(PpagC)，构建体内激活的表达质粒pZW，插入庚型肝炎病毒（HGV）NS3基因，构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL7207，观察PpagC的启动活性。结果表明：Mg2+可抑制PpagC的启动活性，Mg2+浓度小于50mmol/L时培养的重组菌经SDSPAGE和Western blot检测能高水平表达HGV NS3蛋白。Mg2+浓度升至50mmol/L时，NS3蛋白表达量明显降低。收集以50mmol/L Mg2+的培养基扩增的重组菌，灌胃接种C57小鼠，检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子，为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。

摘要:荧光假单胞菌M18对多种植物病原真菌具有显著的抑制作用。荧光假单胞菌(Pseuclomones fluorescens)M18能同时合成吩嗪1羧酸（PCA）和藤黄绿菌素(Plt) 两种抗生素。从M18的基因组中克隆了rpoD基因，其相应的氨基酸序列与荧光假单胞菌CHAO中RpoD蛋白的氨基酸序列完全相同。利用基因重组技术和大肠杆菌荧光假单胞菌穿梭质粒pME6032，将rpoD置于强启动子Ptac的控制下，导入M18菌株。发现经重组质粒转化的M18，与对照相比，培养基中PCA和Plt开始累积的时间分别提前4h和8h，积累量提高1倍和6倍。

摘要:因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列（GenBank L12145）设计了一对特异性引物，用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长3 466bp的片段，然后将其克隆到pMD18T中，经酶切鉴定和序列分析表明克隆是成功的；再将apxⅢA插入到原核表达载体pET28b后，转化BL21(DE3)，在IPTG诱导下获得高效表达，经Western blotting检测证实表达产物有活性。以表达产物包被ELISA板，建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。

摘要:应用RTPCR技术从表现玉米粗缩病症状的玉米叶片中分离克隆了水稻黑条矮缩病毒(Rice blackstreaked dwarf virus, RBSDV)的第九号片段S9(GenBank登录号 AF540976)，并测定了全序列。将该片段的第一个开放读码框(S91)在原核表达载体pET21d中进行了高效表达，表达产物进行N 端氨基酸序列测定，与理论推测的序列完全一致。将表达产物纯化后制备了抗体，经Western blotting从感病玉米叶片中检测到了该蛋白。

摘要:测定了侵染人参果的马铃薯M病毒(PVMCh)基因组全序列。线状、单链正义RNA全长8526bp，含6个开读框(ORF)，具麝香石竹潜隐病毒属(Genus Carlavirus)典型结构特征。序列比较表明它与其他PVM分离物各基因核苷酸和编码蛋白氨基酸序列同源性分别为62.5%～9702%和60.9%～97.4%，其中CP基因最保守，而TGB3基因变异最大。系统进化树分析表明美国爱达荷州马铃薯分离物(PVMId) (AF023877)为PVM的一个远缘株系，而其他4个PVM分离物的成簇在外壳蛋白(Coat protein, CP)和核酸结合蛋白(Nucleic acid binding protein, NABP)区域略有差异。这是PVM在人参果上侵染的首次报道。

摘要:利用RTPCR和nested PCR(nPCR)技术扩增出猪水泡病病毒VP1基因的抗原区，将其克隆到表达载体pProEXHTb中，获得重组质粒，经PCR、酶切和序列分析鉴定表明，目的基因插入的位置、大小和读码框均正确。将重组质粒导入BL21（DE3），经IPTG诱导表达后SDSPAGE检测表明，重组菌能表达猪水泡病病毒VP1抗原区蛋白；Western blot检测表明，诱导表达的抗原区蛋白能与猪水泡病阳性血清发生特异性反应。

摘要:以lacF基因为食品级选择标记，构建了乳酸乳球菌食品级基因表达系统，并进而实现了人铜锌超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的食品级表达。首先构建了含有lacF基因两侧同源DNA序列(0.5kb)的整合型质粒pUCEmDE，通过pUCEmDE与乳酸乳球菌MG5267染色体上单拷贝的乳糖操纵子之间的同源双交换，构建了lacF基因缺失突变的食品级受体菌WZ103 (Lac-)，并经PCR及Lac表型检测所验证。然后构建了互补质粒pMG36eF，其lacF基因的表达受组成型的强启动子P32的控制。将其电转化导入WZ103后，Lac+表型得到恢复，表明WZ103中lacF基因的功能可被互补质粒pMG36eF上的lacF基因互补。随后，以互补质粒pMG36eF为基础，构建了不含任何抗生素抗性选择标记的人铜锌超氧化物歧化酶基因的食品级表达质粒pWZ104。通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和SOD活性凝胶染色分析，检测到WZ103(pWZ104)中Cu/Zn SOD的表达，并且具有生物活性。

摘要:从产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）突变株EAMZ1中分离出一种具有较高转移酶活性的尿苷磷酸化酶(Upase)。经测定这种Upase的分子量为12.8×104，亚基分子量为4.3×10.4，由３个同型亚基组成。N端氨基酸序列为：MRMVDLIATKRDGGE。等电点为4.46。对尿苷的Km为0.29mmol/L。酶反应的最适pH为7.8，最适温度为50℃。该酶能磷酸化尿苷、胸苷、5氟尿苷、2′脱氧5氟尿苷及尿嘧啶βD阿拉伯呋喃糖，且具有较高的转移酶活性，能将尿苷和5氟尿嘧啶转化成5氟尿苷(一种抗癌药物的中间体)，其转化率为47％。该酶的这些特性对于酶法合成核苷类抗肿瘤药物和抗病毒药物是十分有用的。

摘要:测定比较了高产肌苷菌、低产肌苷菌和野生菌肌苷合成途径中PRPP转酰胺酶、sAMP合成酶、IMP脱氢酶和5′核苷酸酶的比活以及活细胞的肌苷水解能力，进一步阐明了菌株产苷性能与肌苷合成途径关键酶活力间的密切关系。根据高产肌苷菌的酶学特性，确定了高产肌苷菌进一步基因工程改造的方向。研究表明酶学研究对有目的、有方向地进行高产菌株的选育工作具有重要意义。

摘要:以焦化废水处理系统的微生物群落为对象，对3种不同培养基（YPG、LB、WW）分离细菌的能力及分离物的种群多样性组成进行了比较研究。同一悬浮污泥样品在YPG、LB和WW培养基上的活菌计数结果分别为1.6×10.6 CFU/mL、7.0×10.5 CFU/mL和98×10.5CFU/mL。从每种培养基10-4稀释度平板上共分离137株分离物。将所有分离物扩增近全长的16S rDNA并用限制性内切酶HinfI对PCR产物进行ARDRA（Amplified rDNA restriction analysis）多态性分析，共得到14种不同的操作分类单元（Operational Taxonomic Unit, OUT）。其中YPG培养基上的分离物显示了8种不同的OTUs，而WW培养基和LB培养基分离物只分别显示了6种和4种OTUs。YPGOTU1和WWOTU6所包含的菌株分别占到总分离物的30%和22.3%，为优势分离物。ERICPCR基因组指纹图分析表明，前者的34株分离物共有20种不同的指纹图类型，而后者的25株分离物只有3种。因此，就分离焦化废水处理系统中的细菌及对分离物进行种群多样性的研究而言，YPG培养基比其他两种培养基更合适。

摘要:采用PCR扩增、随机克隆测序等技术，分析处理含高浓度氨氮的废水处理系统不同驯化时期的4个活性污泥样品，对样品中氨氧化细菌（AOB）的种类和氨单加氧酶（AMO）的活性进行分析比较，并在国内首次采用PCR变性梯度凝胶电泳（DGGE）相结合的技术对样品中总的细菌类群的差异进行研究。结果表明所检测到的氨氧化细菌优势菌群均属于变形细菌的β亚类，与Nitrosomonas sp.具有较高的相似性。活性污泥驯化成熟后，废水处理系统中AMO的活性有明显提高，活性污泥中的细菌类群更加集中，优势菌群相对稳定，系统对废水的处理效率也相应提高。结果表明采用分子检测技术有利于更全面地了解AOB的类群和功能，进而改善废水处理系统的处理效果。

摘要:在对中国柱花草炭疽病进行广泛调查和病原采样收集的基础上，利用RAPD分子标记技术对43个代表性菌株进行了基因组DNA分析，并与276份国外菌株进行了综合聚类分析。 结果表明所用8个引物的扩增片段位于0.3～2.8kb之间， 菌株间呈现显著的DNA多态性。以柱花草起源中心——南美的柱花草炭疽菌分类为基础，中国柱花草炭疽菌可划分成3大类型即Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ类。中国菌株与来自柱花草起源中心——南美的菌株相比之下，其生物多样性和遗传变异性则相对简单。就中国菌株而言海南菌株与广西、广东菌株相比多样性较丰富， 中国柱花草胶孢炭疽菌正在出现种内遗传分化。 从聚类结果看，通常来自于同一个地理区域或同一个寄主基因型的菌株聚成一类， 即同一RAPD聚类组内的菌株通常来自于同一寄主基因型或同一地理区域。说明来自不同寄主基因型或物种的炭疽菌在遗传基因上具有专化性，而地理上隔离的国家或地区的柱花草炭疽病原菌各自具有相对独立的进化途径。

摘要:研究了来自中国大陆9个小西葫芦黄化花叶病毒（ZYMV）分离物的基因组3′末端核苷酸序列及所推导的外壳蛋白（CP）氨基酸序列以及3′末端非编码区（UTR）序列，并与其它地区所报道的16个ZMYV分离物进行了同源性比较。ZYMV CP基因核苷酸序列具有一定的寄主相关性和地域相关性，但总体上其关联程度不明显；同时，CP氨基酸序列的寄主适应性程度明显高于地域相关性。25个ZYMV分离物的CP氨基酸序列根据其变异程度分为2个区： N端约41个氨基酸为高度变异区，CP核心区和C端氨基酸序列为保守区。研究结果初步揭示了ZYMV作为单链RNA病毒通过与寄主相互作用而表现寄主适应性变异的趋势。

摘要:用DTT、H2O2、DEPC、EDC、NAI、NBS、PCMB、2,3Diacetyl和SA 等9种化学修饰剂，处理猪链球菌2型江苏分离株提纯的溶血素，研究其分子中氨基酸侧链基团与其溶血活性的关系。结果表明，巯基、氨基、羧基和酪氨酸残基等与其溶血活性无关，而色氨酸、组氨酸和精氨酸的化学修饰引起溶血活性的大幅度下降，二硫键的化学修饰引起溶血活性的大幅度增强。显示色氨酸、组氨酸和精氨酸残基是该溶血素的活性必需基团，二硫键的断裂可引起其活性增强。

摘要:采用从山苍籽油分离出的柠檬醛作为抗菌药物，产毒和无毒的黄曲霉细胞（Aspergillus flavus cell, AFC）作为药物作用的靶，以显微多道分光光度法和显微图像分析法对被该醛所损伤的AFC进行图像捕获，测定受损伤后细胞内吸收光谱、截面积、周长、长轴长及短轴长所发生的变化。发现在410nm和665nm处产毒AFC存在特征吸收峰，受该醛损伤后产毒和无毒AFC的吸收光谱波峰均发生迁移，且峰面积增大；截面积等4类形态参数的数值随柠檬醛浓度升高而减少；为质膜物理化学及细胞内生理生化指标变化提供了理论依据。表明柠檬醛不仅破坏质膜的选择性通透性，而且使细胞质膜结构改变并进入细胞，与靶分子及靶细胞器作用而引发一系列新的生理生化现象的出现。实现对活态细胞受药物作用后形态及生物大分子动态变化的快速、实时、在位的测定，对抗菌药物作用于细胞并使其发生形态结构及靶分子的变化提供了必要的物理参数，在药物抗菌理论及方法研究上具有重要意义。

摘要:猪链球菌2型（SS2）溶菌酶释放蛋白(MRP)的致病作用迄今不明，为此，以Hep2细胞为上皮细胞体外模型，将纯化的MRP溶液和细胞共孵育，光镜观察，发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化：一是诱导细胞融合形成多核巨细胞，随后巨细胞发生凋亡；二是诱导单个细胞凋亡。透射电镜观察和流式细胞分析确证MRP具有诱导上皮细胞凋亡的功能，凋亡率达18%。证明MRP可单独作为SS2的毒力因子。

摘要:根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)cry1、cry2和cry3型基因的保守区分别设计了3对通用引物Un1(d)/Un1?、Un2(d)/Un2?和Un3(d)/Un3?，以Bt4.0718菌株质粒DNA为模板进行PCR扩增,通过扩增产物片段的分子量大小来确定该菌株所含有的杀虫晶体蛋白基因类型。随后根据上述3类cry基因的高变区设计特异引物再次进行PCR鉴定。结果表明:Bt4.0718菌株含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1Cb、cry2Ac和新基因cry4.5等6种基因类型。这一结果为利用该菌株构建高效广谱杀虫工程菌提供了客观依据。

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