摘要:利用Hungate滚管技术从福建省漳州垃圾处理厂厌氧消化器的颗粒污泥中分离到一株产氢的细菌L15。菌株L15为严格厌氧的革兰氏阳性杆菌，菌体大小为0.5μm～0.7μm×2.5μm～5.0μm，以侧生鞭毛运动。在孢肉培养基上产生端生的卵圆形芽孢。温度生长范围15℃～45℃（最适温度30℃～37℃）；pH 范围5.0～8.4（最适pH 6.3～6.8）。该菌株不水解明胶和七叶灵，不还原硫酸盐，牛奶变酸但不凝固，发酵多糖和少数的单糖、双糖和寡糖；发酵葡萄糖的最终产物为乙酸、丁酸、H2和CO2。G+C含量为298mol%。16S rDNA序列分析表明，该菌株属于梭菌的簇Ⅰ，与Clostridium paraputrificum较为接近（相似性为97.1%）。通过生理特征和16S rDNA序列的同源性分析，表明菌株L15应是梭菌属簇Ⅰ中的一个新种，命名为Clostridium defluvii。菌株L15保藏在中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为AS1.3489。菌株L15的最佳产氢温度为34℃、pH为7.0。当葡萄糖浓度为0.4%时，氢气产率可达到1.41mol H2/mol 葡萄糖。该菌可利用下列底物产酸产氢，括号内为产氢率(底物浓度1%)：果糖(1.00mol H2/mol)、麦芽糖(2.17mol H2/mol)、蔗糖(1.69mol H2/mol)、菊糖(4.70mol H2/mol)、糖原(5.49mmol H2/g)、淀粉(7.34mmol H2/g)。

摘要:从被多菌灵污染的湖南红壤土中分离到一株能以多菌灵为唯一碳源和能源生长的菌株1_1，该菌在含酵母膏多菌灵(500mg/L)的无机盐培养基中与无酵母膏的多菌灵(500mg/L)无机盐培养基中，24d对多菌灵的降解率分别为95.56％和19.6％。根据表型特征、G+C含量及16S rDNA序列分析将菌株1-1鉴定为β-Proteobacteria中的Ralstonia sp.（罗尔斯通氏菌）。

摘要:以表面消毒法分离白肋烟TN90和TRM品种30个样品的内生细菌，共分离到33株内生细菌。对这些菌株进行了初步分类鉴定，它们属于假单胞菌属、黄单胞菌属、节杆菌属、葡萄球菌属、棒杆菌属、黄杆菌属、气球菌属和利斯特氏菌属。筛选出TEB11、TEB17、TEB23、TEB26、TEB30、TEB34等6株还原硝酸盐和亚硝酸盐能力较强的菌株，以粉碎烟叶接种、叶柄浸泡接种和叶面喷雾接种3种方式处理调制后，化验分析结果表明，接种内生细菌能降低27.56%～99.88%白肋烟TSNA含量，降低百分率以粉碎烟叶接种最高，其次是叶柄浸泡接种，叶面喷雾接种最低。

摘要:通过非分离培养分析方法，直接从海绵体内提取细菌总DNA。以样品总DNA为模板进行PCR扩增获得细菌16S rDNA。用16S rDNA限制性酶切片段长度多态性（ARDRA）和测序方法对南海湛江海域海绵Pachychalina sp.体内的细菌多样性进行了研究。在细菌16S rDNA的ARDRA图谱中，大多数克隆的酶切带谱间存在差异；随机挑选22个克隆进行测序得到它们的16S rDNA部分序列，大部分序列属于γproteobacterium和αproteobacterium，但有少数克隆序列与RDP数据库中收录的16S rDNA序列间的相似性极小，不参与系统发育树的构建。研究结果表明海绵Pachychalina sp.体内细菌组成具有丰富的多样性。

摘要:应用显微形态观察和变性梯度凝胶电泳（DGGE）对云南腾冲热海两热泉菌藻席的细菌多样性进行了比较分析。直接从环境样品中提取总DNA，用两套细菌通用引物进行PCR扩增，得到包含V8和V9高变区的16S rDNA片段，进行DGGE分析，结合形态观察，结果显示，热泉菌藻席中存在丰富的细菌多样性，且不同温度范围的菌藻席细菌组成差异显著。

摘要:对5年连续饲养在不同种寄主植物上的B型烟粉虱北京种群的内共生菌16S rDNA基因进行了PCR扩增和测序。结合已知序列，构建了不同寄主植物烟粉虱初生内共生菌约1000bp的16S rDNA及次生内共生菌约1250bp的16S rDNA的分子系统树。结果表明，中国北京不同寄主植物的B型烟粉虱内共生菌及世界其它地区烟粉虱内共生菌可能是同一种的不同生态型，内共生菌在其宿主分化后进行了选择，之后与其宿主长期共同进化、共同适应,为宿主对不同生境的适应提供了一定的基础。

摘要:由于Magnetospirillum gryphiswaldense MSR1缺少简便有效的遗传操作体系和对常见抗生素的抗性，致使对该菌磁小体生物合成的机制等研究工作进展缓慢。为此建立了一套比较简便有效的遗传操作体系，其中包括：以平板封膜培养技术获得单菌落、在选择性培养液中进行接合转移遗传因子，以液体培养和磁铁吸附技术筛选突变子。利用此体系，通过接合转座诱变技术, 获得了2个磁小体缺失突变株，为研究该菌磁小体合成的分子遗传学提供了技术支撑。

摘要:破译了大肠杆菌O54 O抗原基因簇的序列，序列全长14062bp。用生物信息学方法分析序列并鉴定基因，共确定10个基因，包括鼠李糖合成酶基因BDA和C(rmlBDA和rmlC),糖基转移酶基因，O抗原转运酶基因，O抗原聚合酶基因和合成磷酸丝氨酸侧链的基因及1个不能确定功能的开放阅读框。对rmlC的（G+C）%含量，稀有密码子含量及进化分析都表明大肠杆菌O54 O抗原基因簇是在近期通过rmlC介导的重组形成，而且大肠杆菌O54和鲍氏志贺氏菌9型的亲缘关系很近。对UTP葡萄糖1磷酸尿苷转移酶基因（galF）和6磷酸葡萄糖脱氢酶基因（gnd）的进化分析揭示志贺氏菌属与大肠杆菌属在进化上属于同一个属。用PCR方法筛选出了针对大肠杆菌O54的特异基因，用于基因芯片或PCR方法对大肠杆菌O54的快速检测。

摘要:利用TaKaRa LA PCRTM试剂盒扩增枯草芽孢杆菌93151耐盐突变株proA基因的未知下游序列。根据测序结果，设计引物，克隆出发菌株和突变株全长proBA基因。将出发菌株和突变株的proBA基因分别转化大肠杆菌JM83（proBA\+-），均能够与其功能互补。SDSPAGE分析其表达产物，有两条分子量分别约为40kD和45kD的新蛋白带出现。测定4种转化子（分别含有出发菌株和突变株proB基因的大肠杆菌1.1252转化子及proBA基因的大肠杆菌JM83转化子）的耐盐能力。发现含有突变株proB或proBA基因转化子的耐盐能力，均比相应的含有出发菌株proB或proBA基因的转化子高。另外含有出发菌株和突变株的proBA基因转化子的耐盐能力， 也均比相应的仅含proB基因的转化子高， 表明枯草芽孢杆菌的ProA比大肠杆菌的ProA更为有效。测定所有JM83转化子胞内自由脯氨酸，发现其含量随盐浓度的上升而提高，其中含突变菌株proBA基因的转化子提高更为显著。

摘要:利用启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌(Escherichia coli)中分离枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WB600的基因启动子片段，获得55个具有卡那霉素抗性的重组子。对3个抗性最高的重组子pSU-Bs2，pSU-Bs4，pSU-Bs8进行序列测定和同源性分析发现，所克隆到的基因启动子片段均来自于枯草芽孢杆菌的基因组，并且具有枯草杆菌基因启动子的保守序列。对抗性最高的Bs2片段进一步研究表明，它可以在大肠杆菌中高效地启动来自于短小芽孢杆菌的碱性蛋白酶基因的表达, 也能在枯草芽孢杆菌中启动卡那霉素抗性基因的表达。

摘要:利用PCR技术从真养雷氏菌(Ralstonia eutropha)菌株质粒中扩增出12kb的镉抗性系统结构修饰蛋白的编码基因czcC，然后将其克隆到pGEMTeasy载体上，构建重组质粒，经EcoRⅠ酶切分析和核苷酸序列分析，与GenBank中登录的czcC基因序列相似性高达98％，显示其具有正确的czcC基因核苷酸序列，并利用pET30a(+) Vector在E.coli BL21中进行了成功表达。为进一步研究微生物抗镉机理及构建耐镉基因工程菌提供重要的基础资料。

摘要:苹果酸通透酶具有协助苹果酸乳酸发酵（MLF）的重要功能。以酒类酒球菌（Oenococcus oeni）优良菌系OenococcusLeeSD2a的总DNA为模板，用PCR方法克隆到苹果酸通透酶基因mleP，构建了重组质粒pBMmleP。序列分析表明克隆到的基因序列与已报道的序列同源性为99％。为使目的基因在酿酒酵母中表达，以大肠杆菌酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体，以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件，构建了重组表达质粒YEpmleP，并转化酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）YS58。酵母转化子用含有亮氨酸、组氨酸和色氨酸的YNB平板筛选鉴定。获得的转化子在添加了L苹果酸(5g/L)的培养基中培养4d；取培养液上清用HPLC检测，结果显示重组转化子YSP的培养液中L苹果酸剩余含量均低于空载体转化子YS352，因此所得酵母重组转化子对苹果酸的转运能力有所提高。

摘要:采用差异显示PCR技术（Differential DisplayPCR, DDPCR）寻找白色念珠菌的氟康唑耐药相关基因。体外用含氟康唑的酵母培养基（YEPD）诱导培养临床白色念珠菌氟康唑敏感株435（对咪康唑耐药），诱导80d后得到氟康唑耐药子代435.2（MIC=128μg/mL）。DDPCR比较435.2、435分别在含氟康唑、不含药的YEPD液基中的基因表达，找到3个明显差异片段，分别与数据库中白色念珠菌的醇脱氢酶基因ADH1、多药耐药基因CDR1及拓扑异构酶基因TOP2有高度同源性。半定量RTPCR中证实了ADH1、CDR1在氟康唑耐药株中的差异表达；对已知氟康唑耐药基因MDR1作半定量RTPCR时发现MDR1在氟康唑耐药株435.2中无表达，而在氟康唑敏感株435中有表达。结果表明，ADH1、CDR1基因的高表达与白色念珠菌氟康唑耐药性形成相关，ADH1可能是新的耐药基因；MDR1的表达可能在氟康唑敏感株或其它唑类耐药株中也存在。

摘要:以（TATG）4重复序列为引物对香菇属的3个种13个菌株的微卫星区DNA进行PCR扩增，15%的琼脂糖凝胶电泳，获得了25个条带，并且在供试菌株上表现出多态性，可以实现遗传分类研究。为了验证微卫星分子标记实验准确性，又用RAPD技术对13个供试菌株进行了实验。7个引物在13个菌株上共获得了102条多态性条带。通过聚类分析，RAPD获得的分类结果与微卫星分子标记获得的结果一致。此外，为了证明微卫星分子标记获得的条带不是假阳性，在实验中回收了No.10菌株的PCR扩增产物，进行克隆测序。测序结果显示有（TATG）n基序存在，并且达到了微卫星基序重复数量的最低限度。通过本实验可知，香菇中是存在微卫星（TATG）n基序的, 且基序的多态性可以用于香菇的遗传分类研究。

摘要:用分子克隆方法获得口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒、蓝舌病病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段，用芯片点样仪点样到包被过的玻璃片上，制备成检测芯片。提取样品中的RNA，进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交，对杂交结果进行扫描检测，可同时诊断上述5种动物传染病，此方法不但快速、准确、敏感，而且可同时进行多种病毒的检测，达到大批动物高通量检疫的目的。

摘要:用PCR合成的黑曲霉（Aspergillus niger）酸性α淀粉酶（Acid αamylase）的cDNA，构建了由酵母醇脱氢酶（ADH1）启动子和终止子引导表达，酸性α淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母Yip型表达载体pWHY中，构成双基因表达分泌质粒pWAG。采用pWAG与酵母Yep型G418抗性表达质粒的共转化，将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2.346的染色体rDNA序列中，获得同时表达胞外酸性α-淀粉酶和糖化酶的双功能酒精酵母工程菌。

摘要:从木聚糖酶高产短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）BP51中克隆得到木聚糖酶基因xynA，将其构建在芽孢杆菌表达载体pWH1520中得到重组质粒pWSX11。xynA由木糖诱导xylA启动子调控xynA表达。采用同源高效表达策略，以原生质体转化方法将pWSX11转回原始菌株BP51中，获得重组菌株BPX11。通过木糖诱导重组菌株中的xynA基因高效分泌表达，使木聚糖酶产酶活力比原菌株BP51提高了87%，同时对重组表达的木聚糖酶的酶学性质进行了初步研究。

摘要:构建了一株产D,L-乳酸的乳杆菌（Lactobacillus sp. ）MD1的基因文库。利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的Escherichia coli FMJ144作为宿主，在厌氧条件下通过互补筛选获得乳酸脱氢酶基因（ldh），非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（NativePAGE）检测证明其阳性克隆表现出D乳酸脱氢酶（DLDH）活性。核酸序列分析表明，ldhD的ORF编码331个氨基酸残基组成的蛋白质有两个保守区域，其中V147～D176区是NADH的结合位点，R77～E107区据报道是酶的活性部位。该菌株DLDH和D羟基异己酸脱氢酶（DHicDH）属于NADH依赖性脱氢酶家族，ldhD和其他乳杆菌属的ldhD及DHicDH基因和编码的氨基酸序列相似性较低，核酸序列相似性最高达4933%，氨基酸序列相同性最高为42%，是一个新的D乳酸脱氢酶基因。

摘要:从土壤中分离睾酮丛毛单胞菌，提取其基因组DNA，PCR扩增3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）基因。以质粒pET15b为载体，构建3α-HSD的原核表达系统。经IPTG诱导后，得到了具有酶活性的融合蛋白，细菌总蛋白的表达量为0.73g/L，其中融合酶蛋白占16.4%，活性达1.38×10.5U/L。利用融合蛋白N末端的Histag，经金属螯合亲和层析纯化后，得到了纯度较高的融合酶蛋白，酶蛋白的得率为68%，比活性为194.7U/mg。凝血酶切除Histag后，经质谱鉴定，重组蛋白的分子量为26.5kD，与理论推测值基本相同。25℃以雄酮为底物，以NAD+和thioNAD+为辅因子时，融合蛋白参与酶促反应的最适pH分别为10.5和9.4。37℃条件下酶促反应较快，25℃时的反应速度只有37℃时的52％，Q10（25℃～35℃）为1.7。25℃、pH105、以雄酮和各级胆汁酸为底物、NAD+为辅因子时，融合酶蛋白的动力学常数Km位于4.2～51.1μmol/L范围内。融合酶蛋白发挥催化作用并不需要金属离子的参与，而Fe3+、Fe2+、Zn2+则抑制酶活性，反应体系中加入EDTA也并不影响酶的活性。活性和纯度均较高的融合蛋白3α-HSD的获得及其生物学性质的研究，为血清总胆汁酸酶循环法测定的建立奠定了基础。

摘要:克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性。根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp（GenBank AF325807）的序列设计引物，在6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序。以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1λT，构建重组质粒并用酶切和PCR鉴定，进一步在大肠杆菌中诱导表达，并进行免疫印迹分析；纯化表达产物免疫家兔，ELISA检测血清抗体滴度。结果显示Lslp在6株致病钩体中均能扩增出相应片段，且序列同源性达到996%；构建高效原核表达重组质粒pGSTLslP，经IPTG诱导在大肠杆菌中可表达出66kD GST融合蛋白，并能与全钩抗血清发生免疫印迹反应；将上述融合蛋白免疫新西兰大白兔产生1：5120 高滴度的IgG抗体。研究结果提示致病钩体膜蛋白新基因Lslp可在大肠杆菌进行高效表达，表达产物能被全钩抗血清识别，为研究钩体的致病机制和筛选保护性抗原提供了基础。

摘要:野生型hbFGF蛋白可溶性与稳定性较低一直是困扰研发人员的难题。分析其氨基酸序列发现含有4个游离巯基，其中第78、96、101位半胱氨酸游离巯基可能直接影响其可溶性、稳定性及活性。 对天然hbFGF进行定点突变，一组将Cys78、Cys96同时突变，另一组将Cys78、Cys96与Cys101进行联合突变，均改为丝氨酸密码子，然后克隆入原核表达载体pET3c，进行表达， 结果发现两种突变蛋白的可溶性大幅度增加，稳定性明显上升，其中三点突变的效果更为显著，但蛋白质的活性明显下降。可以认为78、96与101位半胱氨酸的游离巯基同时参与了天然hbFGF多聚体的形成，是导致野生型hbFGF可溶性与稳定性较低的主要原因，Cys101还与维持hbFGF的活性直接有关。

摘要:选育得到纤维素酶高产菌株里氏木霉突变菌株(Trichoderma reesei) 813A，优化了其发酵产酶条件。利用该菌株所产纤维素酶对天然木质纤维素的水解糖化过程进行研究，确定了实验条件下最优的糖化条件(温度50℃， pH 4.5，酶浓度6～8 FPU/mL，底物浓度2%)。以玉米叶和杨树叶为天然纤维素原料，水解糖化率分别达到86.2％和56.0%。通过酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)将糖化液转化为酒精，产乙醇浓度达到 5%～5.8%，转化率为79.4%～92.1%。

摘要:枯草芽孢杆菌JA分泌物中具有抑菌作用的粗提液通过DEAESepharose FF、SOURCE 15 PHE、Sephacry1 S200HR和反相HPLC多步柱层析分离纯化后，获得3种对水稻纹枯和小麦赤霉病菌均有抑菌作用的抗菌肽AFP1、AFP2和AFP3。MALDITOF质谱法测得其分子量分别为1462.645D、1476.390D和1490.530D。氨基酸组成分析结果表明，AFP1和AFP3由苏氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、脯氨酸等多种氨基酸组成。目标产物热稳定性好、对蛋白酶有一定的耐受性，推断很可能是低分子量的环状脂肽。

摘要:以热带假丝酵母和八孢裂殖酵母为材料，通过化学抽提法得到多糖粗取物，经DEAE纤维素阴离子交换柱分离纯化得到组分Ma和Mb，经Sephadex G200柱层析鉴定，它们为均一成分，分子量分别为438kD和667kD；蛋白分析表明Ma和Mb为蛋白多糖；经薄层层析和高压液相分析，Ma主要含甘露糖，Mb则由甘露糖和半乳糖组成，其摩尔比为1.3∶1；氨基酸组成分析表明Ma和Mb含有4种极性氨基酸和12种非极性氨基酸；经邻苯三酚自氧化法检测Ma与Mb均能抑制邻苯三酚自氧化，具有体外抗氧化能力。动物实验表明Ma和Mb具有抑制小白鼠肝癌H22实体瘤的作用。

摘要:在实验室条件下，将农田土壤分别用终浓度为1.0mg、5.0mg和10.0mg/g土壤的乙草胺处理40d后，检测可培养的异养细菌的多样性和细菌物种多样性。可培养的异养细菌的多样性依据在LB平板上的菌落形态来研究，细菌物种多样性则通过基因组DNA的提取，纯化，16S rDNA片段的扩增和变性梯度凝胶电泳（DGGE）的分离来研究，香农多样性指数（H），丰度（S）和均匀度（EH）等指标用于评价细菌多样性。实验结果表明，与对照土壤相比，处理土壤中上述两种类型的细菌多样性均降低，而且，不同处理浓度对土壤细菌多样性的影响也不同。将DGGE图谱中的条带回收并测序，结果显示乙草胺对土壤中的Proteobacteria的αProteobacteria 和γProteobacteria影响明显，表明乙草胺会在一定程度上改变土壤细菌多样性。

摘要:猪链球菌2型(SS2)是重要的人畜共患病病原体，溶菌酶释放蛋白（MRP）是SS2的主要毒力因子之一。用天然表达MRP的江苏分离株HA9801和不表达MRP的上海分离株SH006444，研究SS2对仔兔扁桃腺上皮细胞的黏附和侵袭作用。黏附计数结果表明,HA9801（MRP+）和SH006444（MRP-）均能对扁桃腺上皮细胞高水平黏附。扫描和透射电镜均观察到HA9801的高水平黏附现象，黏附部位是细胞膜和细胞微绒毛，并观察到细胞膜上有链球菌正处于内化过程中。裂解记数结果表明，HA9801有低度侵袭力，SH006444未检测到侵袭力。结果提示，扁桃腺是SS2的定殖器官和感染门户；MRP＋菌株黏附后直接侵入细胞内是其穿过扁桃腺上皮细胞屏障的机制之一。

摘要:用PCR方法对从浙江省猪场收集的、以淋巴结肿大和生长迟缓为特征的患猪腹股沟淋巴结进行PCV2检测。将检测为阳性的病料研磨、离心、过滤除菌后，接种PCVfree PK15细胞进行病毒分离，分离获得3株病毒，命名为HZ0201、HZ0202、NB0301。PK15细胞增殖所得病毒离心纯化后，在电镜下可观察到直径约为17～20nm，呈二十面体对称的病毒粒子。以组织和病毒的细胞DNA为模板进行PCV2的全基因扩增，测序结果显示，3株病毒分离物全基因序列均由1767bp组成，直接来自病料与细胞分离毒株的核苷酸同源性为100%。基因组内含有11个ORF。通过比较发现，分离毒株与PCV2参考株的同源性介于94.2%～99.7%之间；与PCV1参考株的同源性为77.2%～77.9%。

摘要:通过建立水稻原生质体培养体系，经多聚鸟氨酸（PLO）介导将提纯的水稻草矮病毒（Rice grassy stunt virus，RGSV）接种到水稻原生质体内，利用酶联免疫吸附法（ELISA）及蛋白免疫印迹法（Western blot），研究RGSV在水稻原生质体内的生长周期及其编码蛋白的表达情况。结果表明： RGSV在接种后24h左右开始在原生质体内复制，36h左右达到最大值。NS6在15h左右开始表达，在30h左右达到最大值。

摘要:设计特异性引物PCR扩增了余杭大蒜病样中的大蒜E病毒（GarVE）的全长CP基因，构建原核表达载体并在大肠杆菌中过量表达，纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。Western blot检测结果表明，抗血清与GarVE的CP起强的特异性反应。7个大蒜样品中，内蒙古赤峰市、宁夏银川和甘肃天水等4个样品受到GarVE的侵染。试验也证明了田间GarVE编码的CP分子量为35kD，不同于已报道的其他葱X病毒属成员的28kD外壳蛋白。

摘要:将少根根霉中Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)的起始密码子周边序列作适当的修改，并把修改后获得的片段(RAD6_1)亚克隆到表达载体pYES2.0，构建重组表达载体pYRAD6_1。经测序验证，把pYRAD6_1转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析，同时以空载体pYES20和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱(GC)和气相色谱/质谱(GC_MS)分析表明，在pYRAD6和pYRAD6_1转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸，而pYES2.0中没有检测到。其中，pYRAD6-1转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的5.23%，而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占2.64%。

摘要:海藻糖主要作用是作为生物体的结构组分、以及保护生物膜和保护蛋白质。在灰树花中，海藻糖在干重中所占比例最高可达到15%～17%，说明灰树花合成海藻糖的能力很强。将灰树花海藻糖合成酶基因克隆，并在大肠杆菌表达系统里表达。表达量为190mg/L。通过活性测定，证明在大肠杆菌中表达的海藻糖合成酶具有酶活性，结合基因工程和酶工程方法，为合成海藻糖的研究提供了新的方向。

摘要:利用绿色荧光蛋白基因gfpmut3，分别标记苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)的cry3A启动子Pcry3A、BtI_BtII启动子PBtI_BtII和来自蜡状芽胞杆菌特异启动子P44-12以研究其表达差异。其中，Pcry3A和PBtI_BtII分别与gfpmut3构成融合基因，以调控gfpmut3在苏云金芽胞杆菌中的表达。将重组质粒pGFP_304(含P44-12)、pGFPExpA(含Pcry3A_ gfpmut3融合基因)和pGFPExpB(含PBtI_BtII_ gfpmut3融合基因)分别导入大肠杆菌(Escherichia coli)和苏云金芽胞杆菌后发现，P44-12和PBtI_BtII在大肠杆菌与苏云金芽胞杆菌中均可表达gfpmut3，其中PBtI_BtII在大肠杆菌中具有极强的启动基因表达的能力。而Pcry3A不能启动gfpmut3在大肠杆菌中表达，在苏云金芽胞杆菌中启动的gfpmut3表达的荧光强度也较弱。进一步通过荧光显微镜和生物活性检测器对含重组质粒pGFP_304、pGFPExpA和pGFPExpB的转化子分别进行荧光检测及微量热检测。结果表明，3种启动子驱动下的gfpmut3基因均可在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171中表达并检测得到不同的发光类型。微量热法检测发现P44_12和PBtI_BtII启动gfpmut3表达的代谢热低于Pcry3A驱动gfpmut3表达的代谢热。

摘要:叙述在植物病原真菌中促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase, MAPK)基因的种类和特征，概括了MAPK基因在植物病原真菌生长发育、胁迫反应和侵染、致病过程中的作用及其研究现状，讨论了进行植物病原真菌MAPK基因研究的意义及重点研究的课题，并根据最新研究进展，提出了植物病原真菌MAPK基因研究的发展前景

摘要:过去10年中，由于基因克隆、遗传转化等分子生物学方法与技术的应用，对赤霉菌中赤霉素生物合成基因的克隆、鉴定、异源表达及其表达调控等分子生物学研究取得了很大进展。现从赤霉菌的转化系统、赤霉素生物合成基因克隆、合成机理及其基因表达调控等方面的研究进展进行综述。