摘要:摘要：本文介绍了2006~2010年国家自然科学基金委员会生命科学部微生物学科面上类、重点和国家杰出青年科学基金项目的资助概况，分析了三类科学基金资助的分支学科分布、依托单位和研究领域状况，对“十二五”期间国家自然科学基金资助微生物学科的重点资助方向进行了展望，以期为微生物科技工作者了解本学科的资助情况提供参考。

摘要:摘要：随着研究的不断深入，血凝素（HA）之外的其他蛋白在影响A型流感病毒的致病力甚至宿主特异性方面具有的重要作用逐渐被证实。本文对神经氨酸酶（NA）、碱性聚合酶2（PB2）及非结构蛋白1（NS1）的相关进展作了综述，以期进一步阐明流感病毒的致病分子基础，并藉此探讨可能的宿主范围限定因素。

摘要:摘要：葡萄酒中的挥发性硫化物是由酿酒微生物在葡萄酒发酵过程中代谢所产生的，主要包括硫化氢、硫醇、硫醚、硫醇酯、含硫杂醇油及杂环化合物等，它们对葡萄酒的风味会产生重要影响。本综述介绍了葡萄酒中重要的挥发性硫化物的主要代谢途径及相关基因的调控机制，并提出酿酒微生物的相关研究是提高优良风味物质含量，同时抑制不良风味产生的有效途径。

摘要:摘要：淀粉普鲁兰酶(E.C. 3.2.1.1/41)同时具有淀粉酶(E.C. 3.2.1.1)和普鲁兰酶(E.C. 3.2.1.41)的功能，属于糖苷水解酶GH13和GH57家族。由于淀粉普鲁兰酶可以同时水解α-1,4和α-1,6糖苷键，在淀粉糖化工业中具有降低生产成本、提高生产效率和提高糖化率的作用。其中高温淀粉普鲁兰酶由于能够在淀粉工业液化条件下同时催化淀粉的液化和糖化反应，因此在淀粉糖化工业中更具有应用价值。另外，淀粉普鲁兰酶的双功能催化机制对酶学研究中也具有重要价值。该文就近年高温淀粉普鲁兰酶的结

摘要:摘要：【目的】旨在揭示水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae, 简称Xoo) 环鸟苷二磷酸（c-di-GMP）信号蛋白VieAxoo的生物学功能。【方法】本研究通过标记置换法对vieAxoo基因(PXO_04753)进行了缺失突变研究，采用表性测定进行了部分功能鉴定。【结果】从野生型菌株PXO99A中克隆的vieAxoo基因序列与其它病原黄单胞菌的同源序列高度保守。VieAxoo具有参与c-di-GMP降解的磷酸二酯酶（PDE）EAL结构域和磷酸信号识别受体REC结构域

摘要:摘要：【目的】为保证超高压中性食品的杀菌强度，可以??????????通过添加Nisin等细菌素协同杀菌以达到商业无菌要求。本文从分子水平和超微结构揭示二者协同作用下的细胞致死机理，为超高压杀菌在中性食品中的应用奠定理论基础。【方法】采用pH7.0的环境体系，100－500 MPa的超高压处理，Nisin浓度为200 IU/mL。通过荧光染色法和紫外吸收法检测细胞膜通透性，傅里叶转换红外光谱法检测细菌细胞壁、蛋白以及核酸的变化，透射电镜观察细菌在协同作用下的形态变化。【结果】结果发现：中性条件下，超高压与

摘要:摘要：【目的】筛选一株对甜菊苷具有特异转化性能的细菌，并对该菌及转化产物进行鉴定，探讨转化酶及酶对甜菊苷的转化特性。【方法】通过16S rDNA序列分析，构建该菌系统进化树，结合菌体形态及菌落特征，确立该菌系统发育学地位。通过高效液相色谱（HPLC）及液质联用（LC－MS）法检测并鉴定转化产物。用菌液直接对甜菊苷进行转化以研究菌的转化能力。用静息细胞、胞外液和胞内液对甜菊糖分别转化法，确定转化酶与菌体的关系，并用该酶液进行转化特性研究。【结果】该菌株与黄杆菌属的16S rDNA序列相似性为99%，结合菌体

摘要:摘要：【目的】调控Sacchromyces cerevisiae丙酮酸节点碳流分布促进L-乳酸积累。【方法】利用同源重组方法，将来源于Bovine的乳酸脱氢酶基因LDH整合到S. cerevisiae CEN.PK2-1C基因组中，同时敲除丙酮酸脱羧酶基因PDC1，将碳流导向L-乳酸的积累，构建了基因工程菌S. cerevisiae CEN.PK2-1C[LDH]。在此基础上，通过分析丙酮酸节点处关键酶对NADH的Km值不同，而将来源于Streptococcus pneumoniae 的NADH氧化酶(n

摘要:摘要：【目的】为了研究肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae, S.pn）的一种假想的溶菌酶样蛋白在细菌生物学性状及其致病中的作用。【方法】利用长臂同源PCR对该基因进行敲出，并同时构建带有拯救质粒的缺失菌株，观察D39野生菌、缺失菌与带有拯救质粒的缺失菌株在相关生物学性状及其致病力改变，从而鉴定这种假想溶菌酶样蛋白的功能。【结果】缺失菌与野生菌相比，细菌生长减缓，毒力下降，荚膜多糖合成明显减少。而将拯救质粒转入缺失菌株后，该溶菌酶样蛋白的mRNA表达水平较野生菌高，其毒力及荚膜合成

摘要:摘要：【目的】通过定点突变确定嗜酸热脂环酸杆菌中甘露聚糖酶的活性催化位点。【方法】根据序列比对和GH53家族的结构信息选择可能的催化活性位点，利用重叠PCR法构建定点突变体，采用薄层层析（TLC）法和3,5－二硝基水杨酸（DNS）法检测各酶蛋白活性。【结果】通过重叠PCR法成功构建了7个位点的突变体，其中第150和159位的氨基酸突变对活性改变甚少或几乎没有，而第151和231位谷氨酸的羧基基团的改变以及双位点突变体E2Q则导致其对各种底物催化活性的丧失，说明位于β4和β7折叠的C末端的E151和E231

摘要:摘要：【目的】本研究皆在了解虾养殖底泥中氨氧化细菌与氨氧化古菌群落多态性。【方法】以功能基因为基础，构建氨氧化细菌（AOB）与氨氧化古菌（AOA）的氨单加氧酶α亚基基因（amoA）克隆文库。利用限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）技术将克隆文库阳性克隆子进行归类分析分成若干个可操作分类单元（Operational Taxa Units，OTUs）。【结果】通过序列多态性分析，表明AOB amoA基因克隆文库中所有序列都属于变形杆

摘要:摘要:【目的】研究自然界中的氨氧化微生物对于理解全球氮元素循环至关重要，而人们对于人工坝体对氨氧化微生物种群生态的影响还知之甚少。本工作旨在分析三峡大坝两侧水体中浮游和附着在颗粒表面的氨氧化微生物种群构成的多样性，并试图分析其潜在的控制因素。【方法】在靠近三峡坝体的上游水体及下游水体中各选取1个取样点，在取样点现场测量水体理化参数并收集生物量，采用氨氧化功能基因的mRNA逆转录产物构建克隆文库等技术分析样品中氨氧化微生物种群的多样性。【结果】坝下水体中浊度、溶氧量和氧化还原电位略高于坝上水体。坝体两侧的氨

摘要:摘要：【目的】 通过融合基因表达载体和共免疫基因表达载体研究大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）B亚基基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗免疫应答的影响。【方法】提取大肠杆菌44815菌株基因组DNA，通过PCR方法从基因组DNA中扩增LTB基因，同时采用PCR方法从含有犬细小病毒VP2基因的质粒中扩增VP2的主要抗原表位基因（VP2-70，编码70个氨基酸）。将上述基因分别连接到含有人CD5信号肽序列的载体pcDNA-CD5sp上，分别构建成它们的分泌型真核表达载体，pcDNA-CD5sp-LTB 和pcDNA-

摘要:摘要：【目的】构建、表达人源二硫键稳定单链抗体（scdsFv），检测其生物活性，以获得对狂犬病病毒有特异结合能力及中和活性的scdsFv蛋白。【方法】从GenBank上获得RV单抗SO57重链可变区VH和轻链可变区VL序列，在VH44和VL100位各突变一个氨基酸为半胱氨酸，用linker连接形成scdsFv，人工合成此序列，克隆入表达载体pET22b(+)，在大肠杆菌中表达目的蛋白，镍柱亲和层析法纯化，并进行SDS-PAGE、Western blot鉴定。ELISA法和鼠脑组织抹片方法检测scdsFv对

摘要:摘要：【目的】分析猪圆环病毒2型（PCV2）与猪细小病毒（PPV）共感染对猪肺泡巨噬细胞（PAM）吞噬功能及其干扰素表达水平的影响，为进一步阐明猪断奶后多系统衰减综合征的发病机制提供实验依据。【方法】将48头5周龄健康仔猪随机分为PCV2组、PPV组、PCV2/PPV组和对照组，每组12头。PCV2和PPV组经口鼻途径分别接种PCV2或PPV，PCV2/PPV组同时接种PCV2和PPV，对照组接种细胞营养液。感染后3、7、14和35 d（dpi）从每组随机选择3头剖杀，检测PAM的存活率、吞噬活性及其α1

摘要:摘要：【目的】通过根癌农杆菌介导的方法构建日本曲霉转化子库，从而筛选出高产甘油氧化酶的日本曲霉突变菌株。【方法】本文通过三亲杂交的方法将双元载体pBI-hphII 转移至根癌农杆菌EHA105中并作为侵染菌株，以日本曲霉As5999为受体菌株，建立了农杆菌介导的日本曲霉转化体系，构建了突变体库，并对影响转化效率的根癌农杆菌浓度，乙酰丁香酮（As）加入与否，共培养时间，共培养温度等因素进行了分析。【结果】对转化子的PCR检测和Southern杂交分析表明，T-DNA已整合进日本曲霉基因组中，随机挑选的9 个

摘要:摘要：【目的】对塔克拉玛干沙漠腹地胡杨林土壤细菌多样性进行初步探索，为下一步从中筛选可用于生物饲料或生物肥料的微生物奠定基础。【方法】采用可培养方法，进行细菌的分离纯化。对各菌株进行革兰氏染色及淀粉酶、酯酶、纤维素酶和NaCl耐受浓度的测定，并提取各菌株基因组DNA，进行16S rRNA基因扩增、测序及系统进化树的绘制，分析其多样性。【结果】共分离得到27株菌，其中放线菌门(Actinobacteria) 16株，变形菌门(Proteobacteria) 4株，厚壁菌门(Firmicutes) 6株，拟杆

摘要:摘要: 【目的】采用完整的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus , PRRSV) 颗粒筛选噬菌体肽库，以获得能高亲和力结合并能抑制该病毒复制的特异性多肽。【方法】用纯化的病毒粒子包被ELISA板，再用M13噬菌体随机12肽库进行筛选。经过3轮淘筛，ELISA鉴定噬菌体单克隆与PRRSV的亲和力，选取与PRRSV具有高亲和力的噬菌体单克隆进行DNA测序，据此推导多肽的氨基酸序列。通过TCID50检测其抗病毒复制能力，同

摘要:摘要：【目的】为了研究出一种能够针对A亚群禽白血病的快速特异性诊断试剂。【方法】将A亚群禽白血病病毒（ALV-A）SDAU09E1株接种于DF1细胞上，以感染细胞DNA为模板，通过PCR方法扩增出1023bp的ALV-A-gp85基因。将其正确阅读框架插入表达载体PET-32a（+）中，实现在BL21（Rosetta）宿主菌中表达。将纯化的融合蛋白常规免疫小鼠，制备得抗血清。【结果】实验成功获得52.8kDa的重组融合蛋白，且具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验（IFA）表明该血清可与ALV-A和ALV-