摘要:

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摘要:工程微生物作为生物制造与新生物经济发展的核心驱动力量，其战略价值日益凸显。新近建设的教育部工程微生物资源库力求突破传统“菌种保藏中心”的局限，构建一个以信息技术为支撑，集资源获取、智能创制、数据分析与开放共享功能于一体，面向基础研究、技术开发、产业应用需求的综合性资源创新服务平台。本文详细阐述了资源库“三位一体”的建设框架：以规模化资源保藏为基础，智能化挖掘分析为核心，数字化存算共享为纽带。通过开展特种与工业微生物及质粒的规模化获取与标准化保藏工作，并整合高通量自动化、多组学、单细胞分析、人工智能(artificial intelligence, AI)预测模型及数字孪生等前沿技术，使资源库实现“获取保藏-分析鉴定-数据共享”的全流程贯通。在借鉴美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection, ATCC)等国际知名机构标准化与质量控制体系的基础上，创建“活体-信息-智能”的资源库模式，为我国合成生物学、代谢工程、生物医药、环境修复等领域的科技创新与产业升级提供强有力的资源保障与技术支撑。

摘要:微生物专利菌株作为生物技术的“基因芯片”，其保藏量与发放量的动态平衡已成为衡量国家生物经济竞争力的重要标尺。本文通过对比2001-2023年全球专利菌株保藏与发放数据，系统分析了中美等国在资源储备与流通效率方面的差距。结果表明，我国虽保藏量居全球领先地位，但发放率远低于国际水平，制约了技术创新与产业转化。本研究提出可通过优化保藏体系、强化政策协同、推动产学研协同创新、加强国际合作以及实施人工智能与区块链技术应用的全链条战略等策略，提升菌株发放率，激活我国专利微生物资源价值，助力我国抢占全球生物经济制高点。

摘要:在国家粮食安全面临“人多地少”刚性约束和饲用蛋白原料高度依赖进口的背景下，“向微生物要热量、要蛋白”已成为构建多元化食物供给体系的战略高地。微生物替代蛋白具有不与人争粮、不与粮争地、工业化生产效率高等显著优势，是农业领域典型的“新质生产力”。本文基于全球生物制造发展态势，系统梳理了我国微生物替代蛋白在合成生物学菌种创制、气体发酵、工业化量产等方面取得的进展，深刻剖析了当前面临的优良菌种知识产权受限、规模化生产成本高企、安全评价标准滞后等核心瓶颈。在此基础上，从加强有组织的基础研究、构建“教育科技人才三位一体”的智能制造体系、重塑行业准入与安全监管政策等方面提出了针对性建议，为我国抢占全球生物农业制高点提供决策参考。

摘要:微生物的“暗物质”涵盖未被培养的微生物类群及其未知生物学特征，这一概念已被微生物学界广泛认可。随着微生物研究模式的不断发展，研究人员相继提出了一系列关于微生物的“暗物质”概念，且大量有关“暗物质”的研究进展已被报道。然而，这些概念内涵复杂且相互交叉，其内在联系与区别尚未得到清晰梳理。本文系统梳理了当前各类微生物相关“暗物质”的概念框架，并分析了微生物相关“暗物质”的研究方法及发展趋势。这将有助于微生物资源领域的研究者更清晰地认识微生物相关“暗物质”的内涵与研究现状，推动微生物的“暗物质”资源挖掘工作向更深层次迈进。

摘要:天然微生物组的应用受限于其组成复杂、功能难以调控，因此合成微生物组成为微生物组工程的核心方向。早期二元合成微生物组在受控条件下能够实现功能协同，但在真实复杂环境中由于代谢单一、冗余不足，其稳定性与功能持久性较差。近年来，合成微生物组研究从经验驱动转向理性设计，在菌株资源获取、构建策略(“自上而下” “自下而上”及混合范式)以及计算工具(如基因组尺度代谢模型)等方面取得进展。然而，现有研究框架对复杂环境下群落的稳定性、鲁棒性及生态互作的重视不足。本文梳理了合成微生物组构建范式的演进脉络，评述了增强群落稳定性的关键要素，通过构建多层次代谢网络提升其在复杂环境中的功能持续性与鲁棒性。展望未来，需整合多学科技术，推动工程化微生物组向可预测、长期稳定的方向转变，为构建高鲁棒性合成微生物组提供理论框架与研究方向。

摘要:微生物作为地球上最古老且种类最丰富的生命形式，因其具有差异化代谢潜能与生物合成能力，为新型药物、天然活性产物的开发提供了核心资源，具有重要的开发价值。目前，人工智能(artificial intelligence, AI)与微生物菌株开发的深度融合，正推动生命科学领域从“经验筛选”向“理性设计”的范式变革。这一变革既源于传统研究方法在解决微生物资源复杂性方面存在局限性，也得益于AI在多组学数据分析、模型预测及实验流程优化方面具有的独特优势。本文系统综述了AI在微生物菌株开发与应用中的作用，涵盖菌种选育、代谢产物开发、疾病诊断与治疗以及外源物质合成4个方面。此外，本文还讨论了AI在菌株开发过程中的核心优势及存在的局限性。概言之，AI通过自动化建模与科学化预测，不仅加速了微生物菌株开发进程，还提供了多维度优化策略，成为推动技术革新的核心驱动力。AI技术融合有望突破传统产业瓶颈，推动微生物产业可持续发展。

摘要:重离子辐射具有诱变率高、诱变谱宽、突变体稳定等独特优势，在微生物菌种选育中发挥着重要作用。然而，辐射诱变育种固有的随机性限制了其效率与质量的进一步提升，这已成为研究者亟待突破的核心难题。根据重离子辐射诱变育种的流程，本文提出一套串联策略以推动高效、高质量的重离子辐射诱变育种实践。该策略包括：从立体维度优化辐射参数，调控细胞辐射损伤敏感性与修复能力；结合重离子辐射、实验室适应性进化及其他诱变剂开展渐进式辐射处理；并通过高通量筛选及后续的鉴定、验证和整合，提高诱变率、筛选效率和正向突变的利用率。同时，针对重离子辐射诱变育种的完整闭环，本文展望了整合系列策略的诱变育种工作站，为基于重离子辐射的优良微生物资源创制提供重要参考。

摘要:高盐环境微生物(包括嗜盐菌和耐盐菌)广泛分布于盐湖、海洋及盐渍土等极端生境，因其独特的代谢适应机制而成为结构新颖天然产物的重要来源。本文概述了其分类地位与生态分布，重点总结了初级代谢产物中四氢嘧啶、甘氨酸甜菜碱等相容性溶质的化学结构，以及它们在渗透压调节和生物大分子保护中的核心作用；系统梳理了次级代谢产物中生物碱、萜类、甾体及聚酮类化合物的结构类型，归纳了这些化合物所展现的抗菌、抗肿瘤、抗氧化、酶抑制及光保护等生物活性，并探讨了构效关系。基于代谢产物的独特性质，分析了其在医药健康、生物材料、环境修复等领域的应用前景，为高盐环境微生物资源的深度开发及新型生物活性分子的研发提供理论参考。

摘要:群体感应(quorum sensing, QS)是一种微生物通过分泌并感知信号分子进行通信，进而调控群体行为的机制，在益生菌生物被膜的形成与肠道定植过程中发挥重要作用。近年来，干预益生菌的QS已成为合成生物学领域的研究热点。本文综述了QS在益生菌中的分布情况，以及基于QS的益生功效干预策略；概述了目前已报道的益生菌QS系统，并对光电化学、色谱-质谱联用等检测益生菌QS的方法进行了总结与分析；重点阐述了干预益生菌QS的主要途径，包括QS激动剂的开发以及相关代谢通路的优化等。本文提出的基于QS的益生菌干预策略，为调控工程益生菌的功效提供了一种新型方案，对益生菌功能食品的开发与改进具有重要意义。

摘要:目的 探明新疆北部罗布麻内生细菌和根际细菌的多样性及群落组成，筛选具有高效、专一性脱胶潜力的菌株资源。方法 采集克拉玛依、阜康、乌鲁木齐及吐鲁番4个地区的罗布麻样品，利用16S rRNA基因高通量测序技术分析细菌群落结构；采用纯培养技术分离菌株，并通过刚果红染色与酶活力测定筛选具有木聚糖酶和果胶酶活性，而无纤维素酶活性的功能菌株。结果 高通量测序共鉴定出38门345科872属的细菌。其中假单胞菌门(Pseudomonadota)和放线菌门(Actinomycetota)为优势菌门。细菌丰度与多样性表现为根际土壤>根部>叶>茎；吐鲁番样地微生物丰度和多样性低于其他三地。从样品中分离获得361株纯培养细菌，分属于4门47科86属。从中筛选出9株专性脱胶功能菌，其中7株(77.78%)为来源于茎和叶的内生菌。功能最优菌株Bacillus rugosus (VFS.M1.04)的木聚糖酶与果胶酶活力分别为2 237 U/mL和1 002 U/mL。结论 罗布麻内生细菌与根际细菌群落结构受所处生境和植物部位影响。Bacillus是其中的优势功能菌属，采用“同源筛选”策略从其茎、叶内生菌中能有效获得脱胶能力强且不损伤纤维素的优良菌株，为开发罗布麻绿色生物脱胶工艺提供了宝贵的菌种资源与理论基础。

摘要:目的 探究中国西部极端环境(冰川、盐湖、荒漠等)中可培养酵母菌的物种多样性，并挖掘具有特殊抗逆性的酵母菌株资源。方法 采集极端环境中的多种基质样品，运用8种不同营养梯度的培养基，结合直接涂布与富集培养策略开展菌株分析；采用26S rDNA D1/D2区域序列分析进行菌株鉴定及系统发育分析；通过统计分析，揭示不同生境及培养条件下可培养酵母菌的物种多样性及其群落结构差异。结果 共分离出904株酵母菌，隶属于2门5亚门10纲17目29属77种，其中包含11个潜在新种。担子菌门为绝对优势类群，优势属包括长西氏酵母属(Naganishia)、红酵母属(Rhodotorula)和囊担菌属(Cystobasidium)。不同生境的优势物种存在差异，浅白长西氏酵母(Naganishia albida)和阿德利长西氏酵母(Naganishia adeliensis)在所有极端生境中广泛存在，显示出极强的广谱环境适应性；胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和斯洛菲囊担菌(Cystobasidium slooffiae)则是冰川和盐湖环境的优势物种。此外，富集培养和寡营养培养基显著提高了稀有物种的分离效率。结论 中国西部极端环境蕴藏着极为丰富的酵母菌资源。不同极端环境筛选出了独特的优势类群，同时也存在具有多嗜极特征的广适性物种。极端环境不仅是新物种的资源库，也可能是条件致病性酵母菌的潜在环境储库。

摘要:目的 解析漳江口红树林沉积物中可培养细菌的多样性格局与产酶能力，重点探究其中优势芽孢杆菌类群的分布特征及其环境驱动机制。方法 采用稀释涂布法分离细菌，基于16S rRNA基因测序进行鉴定；利用平板法检测8种胞外酶活性。结果 共分离获得1 392株菌株，隶属于4门97属，其中芽孢杆菌类群为绝对优势群(占比57.8%)。初筛发现263株(18.9%)潜在新分类单元，多集中于芽孢杆菌(Bacillus)及喜盐芽孢杆菌(Halobacillus)等属。统计分析表明，可培养细菌整体Shannon多样性在核心区和出海口均显著高于入海口(P<0.05)，群落结构存在显著空间差异(P<0.05)，主要受盐度及金属离子驱动；而芽孢杆菌群落结构在空间上相对稳定，主要受pH及碳氮营养因子影响。酶活筛选显示，分离菌株在蛋白酶(64.2%)与脂酶(52.6%)上的阳性率最高；芽孢杆菌类群在多种酶类上的阳性率均高于群落平均水平，显示出广谱代谢潜力。结论 漳江口红树林沉积物蕴藏着丰富的可培养细菌资源。除优势的芽孢杆菌外，假单胞菌门和拟杆菌门是维持群落多样性的关键组分。芽孢杆菌类群凭借其高生态稳定性与多底物降解能力，与其他类群共同驱动红树林沉积物的元素循环。

摘要:目的 新疆盐碱生境蕴藏着丰富且独特的微生物资源，为系统挖掘新疆典型盐碱环境的可培养微生物资源，揭示其多样性及潜在应用价值，本研究对巴里坤湖、艾丁湖等7个不同盐碱生境开展了系统性分离培养。方法 采集盐湖沉积物和盐碱土样品，选用13种差异化培养基，通过梯度稀释涂布法进行菌株分离。结合16S rRNA基因序列测定、系统发育树构建及多条件培养实验，分析菌株的物种组成、培养基筛选效果、盐度适应性，并进一步解析潜在新物种、厌氧菌株及高产胞外多糖(exopolysaccharide, EPS)菌株。结果 共分离获得935株细菌菌株资源，归属于4门8纲25目54科125属310种，其中包括20株(15种)潜在新物种。本研究中，芽孢杆菌门(Bacillota)、假单胞菌门(Pseudomonadota)和放线菌门(Actinomycetota)为优势可培养类群。此外，本研究还获得52株(20种)厌氧细菌，这些厌氧菌株主要分布于盐单胞菌属(Halomonas)。不同培养基和盐度对纯培养微生物类群的影响较为明显：R2A培养基筛选到的物种数最多，共108种；在不添加盐胁迫(0 NaCl)时芽孢杆菌属(Bacillus)为主要类群；在中度盐胁迫(5% NaCl)条件下，海杆菌属(Marinobacter)为重要类群之一；无论是在低盐(0 NaCl)、中盐(5% NaCl)还是高盐(10% NaCl)条件下，Halomonas始终是优势类群。为获得具有极强抗逆性能的功能菌株，本研究进一步通过高盐高碱条件筛选，最终获得15株具有产胞外多糖能力的菌株，其中，棕沙居海杆状菌(Marivirga harenae) EGI S10258和南极嗜碱盐单胞菌(Halomonas alkaliantarctica) EGI S10283产量最高，可达4.5 g/L。结论 新疆盐碱生境蕴藏丰富的可培养微生物资源，采用盐度和培养基多策略组合的方法极大丰富了盐碱生境微生物资源。在此基础上，本研究成功获得一批潜在新物种及具特定功能的菌株，为其后续的系统分类、生态适应机制解析与资源开发利用提供了重要的菌种和数据支撑。

摘要:目的 为改善强酸性土壤结构不良、肥力衰退等问题，分离具有耐酸产胞外多糖(exopolysaccharides, EPS)特性的多种微生物，构建复合菌剂，并评估其对酸性土壤结构与综合肥力的改良效应。方法 从重庆南川、云南曲靖的强酸性土壤(pH<4.5)中经初筛、复筛获得目标菌株，鉴定其拮抗性、促生性等并构建复合菌剂；采用室内土培实验探究不同菌剂处理的强酸性土壤中养分含量及团聚体组成的变化，综合评价肥力改良效果，明确团聚体形成与EPS含量的相关关系。结果 筛选获得3株具有耐酸、产EPS特性的菌株：副伯克霍尔德菌(Paraburkholderia fungorum) C3、洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia) A13以及小囊担子菌(Cystobasidium minutum) B14。这些菌株兼具分泌吲哚乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)、合成铁载体以及溶磷能力。进一步将它们单独或构建成复合菌剂分别施入土壤，发现复合菌剂对土壤养分提升效果最佳，有机质、碱解氮、有效磷、速效钾含量分别提升4.51%、13.92%、4.92%、3.71%。施用各菌剂均可有效促进大团聚体形成，其中单一菌剂C3的促团作用最显著，土壤平均质量直径(mean weight diameter, MWD)提升19.39%；经复合菌剂处理后的土壤肥力综合指数(integrated fertility index, IFI)达0.61，综合改良效果最佳；单一菌剂C3与复合菌剂分别使土壤EPS含量显著提高53.17%、35.79%。相关性分析结果表明，土壤EPS含量与大团聚体含量、MWD呈显著正相关，其可显著促进土壤大团聚体形成并增强其稳定性。结论 本研究筛选出的由3株耐酸产EPS微生物组成的复合菌剂可有效改良土壤结构，提升土壤综合肥力，为改良酸性土壤的生物制剂研发奠定了必要的理论基础。

摘要:层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)是大豆根腐病的一种重要病原菌，前期从运城盐湖中分离到一株耐盐生防芽孢杆菌YH7-4。目的 探究菌株YH7-4对大豆生长的影响及对根腐病的防治效果，并从全基因组层面解析其抑菌机理、挖掘抗菌基因。方法 采用平板对峙培养检测YH7-4的抑菌效果；利用盆栽接种试验测定YH7-4对大豆幼苗的安全性和对根腐病的防效等；利用Illumina和PacBio平台相结合的测序技术对菌株YH7-4进行全基因组测序，并进行代谢系统分析、毒力基因预测、转运蛋白分析、与生防作用相关基因分析、比较基因组学分析以及生化测定等。结果 菌株YH7-4对大豆根腐病层出镰孢菌、大豆疫霉、炭疽菌、拟茎点种腐病菌等病原菌的抑菌率均达到75.00%以上。盆栽试验结果显示，YH7-4菌悬液在OD₆₀₀为0.8时对大豆幼苗的根长和干重有显著促进作用，浓度过高则失去促进作用；其对层出镰孢菌引起的大豆根腐病的防治效果达到56.02%。全基因组测序结果显示，其基因组全长为3 945 352 bp，G+C含量为46.51%，预测到3 756个编码基因。将预测得到的基因序列分别与NR、Swiss-Prot、Pfam、COG、GO、KEGG等数据库比对，分别有3 753、3 537、3 358、3 082、1 756和2 845个基因得到注释。其中，有130个蛋白质结构域属于CAZy家族；12个次级代谢产物基因簇，包括：8个已知抗生素合成基因簇(surfactin、macrolactin H、bacillaene、fengycin、difficidin、bacillibactin、bacilysin和butirosin A/butirosin B)和4个未知功能基因簇。此外，还发现2个与铁离子转运相关的基因、1个与诱导抗性相关的基因以及15个与生物膜形成相关的基因。比较基因组分析结果显示，YH7-4属于贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，直系同源核心基因簇有2 898个。生化特征结果表明，YH7-4具有产生淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、纤维素酶等特性。结论 从运城盐湖中分离到的耐盐贝莱斯芽孢杆菌YH7-4对大豆根腐病具有较好的防治效果，且含有与生防特性相关的基因以及产生多种抗菌物质的基因，为植物真菌病害的防治提供了应用材料。本研究将盐湖中分离到的细菌菌液应用于植物根部，对大豆生长产生了一定影响，为进一步解析贝莱斯芽孢杆菌YH7-4的抑菌机制提供了理论基础。

摘要:对乙氧基苯胺(para-ethoxyaniline, ETH)作为一种广泛应用的工业原料和中间体，其在环境中的残留可能具有持久性，从而对生态环境和人类健康构成潜在风险。目的 从活性污泥中筛选对ETH具有高效降解能力的菌株，优化其降解条件，并基于转录组学和质谱分析揭示该菌株在ETH胁迫下的基因表达调控机制，识别关键降解相关基因及代谢通路。方法 以ETH为唯一碳源，从活性污泥中筛选和分离高效降解菌株，结合形态学观察、生理生化实验，以及基于16S rRNA基因序列构建系统发育树分析，对目标菌株进行分类鉴定。研究不同温度、pH和ETH初始浓度对菌株生长及ETH降解效率的影响。进一步利用转录组测序技术鉴定相关差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)，并使用实时荧光定量逆转录PCR (real-time reverse transcription quantitative PCR, RT-qPCR)验证部分上调基因，结合质谱分析结果深入解析相关代谢通路。结果 成功分离获得1株ETH高效降解菌DQ78，经形态学观察及分子生物学鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。降解条件优化试验结果表明，菌株DQ78在温度28 ℃、pH 8.0、ETH初始浓度4 mmol/L、接种量1%的条件下，40 h内对ETH的降解率达到100%。对其降解产物进行鉴定，共鉴定出3种中间产物，初步提出了ETH的降解途径。转录组分析显示，ETH诱导组检测到3 380个DEGs，其中1 609个基因上调，1 771个基因下调。GO富集分析表明，在ETH胁迫条件下上调基因显著富集的GO terms有57个，主要涉及氨基酸代谢和合成、细胞运动、三价铁结合、物质转运等过程，这些通路可激活ETH降解相关酶的合成，增强底物摄取及中间产物跨膜代谢。下调的GO terms有58个，主要包括肽的代谢与合成、核糖体结构及细胞组成等通路，反映菌株为优先保障ETH降解相关功能蛋白合成，对非核心代谢进行能量重分配。KEGG富集结果显示，在ETH胁迫条件下上调的通路有183个，下调的有184个，主要涉及鞭毛组装、硫代谢及胞外生物合成等，表明菌株通过增强底物趋化捕获，促进酶分泌与抗逆物质合成等方式协同响应ETH胁迫。结论 菌株DQ78在40 h内完全降解ETH，为环境中ETH污染的生物修复提供了优良菌种和理论支持。转录组分析揭示了该菌响应ETH的分子调控机制，为深入探索微生物降解有机污染物的遗传基础提供了理论支持。

摘要:荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是我国重要的热带、亚热带水果。由荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.)侵染引起的荔枝霜疫病严重危害荔枝的生产和采后贮藏过程，是我国荔枝产业健康发展的重大威胁。目的 筛选高效拮抗荔枝霜疫霉的细菌菌株并评价其植物促生潜力，以丰富荔枝霜疫霉拮抗菌资源库。方法 采集荔枝根围土壤样品，采用高通量培养法分离细菌，基于16S rRNA基因序列进行菌株鉴定。采用平板对峙法筛选拮抗荔枝霜疫霉的活性菌株，并通过功能平板测定评价拮抗菌株的促生功能(溶磷、解钾、固氮、产铁载体、产吲哚乙酸)。结果 共分离获得细菌327株，其中92株对荔枝霜疫霉表现出拮抗活性(菌丝生长抑制率大于40%，分离到拮抗菌的阳性率达28.13%)。这些拮抗菌株系统发育多样，涵盖4门[主要为芽孢杆菌门(Bacillota)和假单胞菌门(Pseudomonadota)] 6纲12目20科42属，其中芽孢杆菌属(Bacillus)和类芽孢杆菌属(Paenibacillus)为优势属。对92株拮抗菌的促生功能评价显示：55株菌(占59.8%)具备至少一种促生能力；30株菌(占32.6%)同时具备3种以上促生能力。综合拮抗活性和促生功能，发现兼具抗病和促生功能的短芽孢杆菌属(Brevibacillus)的菌株T101、4株类芽孢杆菌属(Paenibacillus)的菌株(T431、T270、T327和T234a)，及副伯克霍尔德氏菌属(Paraburkholderia)的菌株R116b是最具生防应用潜力的菌株。结论 本研究成功筛选出多株兼具拮抗荔枝霜疫霉活性与多种促生功能(溶磷、解钾、固氮、产铁载体、产吲哚乙酸)的细菌菌株，为荔枝霜疫病的绿色防控及荔枝生态友好型种植体系的构建提供了宝贵的微生物资源。

摘要:目的 挖掘新疆传统奶酒发酵体系中的优良酵母菌种资源，筛选适配奶酒发酵的专用菌株，为奶酒专用发酵剂的开发提供理论依据和菌种储备。方法 以产醇、产酯能力、乳糖利用能力以及耐酸(pH)、耐糖、耐乙醇性能为筛选指标，采用梯度稀释分离法结合选择性培养基分离酵母菌株。通过形态观察和分子生物学鉴定明确菌株的分类地位，研究其生长特性、碳源利用能力及生物安全性，结合感官评价和电子鼻技术评价菌株对发酵风味的贡献。结果 从新疆传统奶酒引子及传统发酵乳制品中分离纯化获得40株酵母菌株，经多轮筛选得到2株功能优良的菌株(J17和J23)。这2株菌可耐受pH 2.5、350 g/L葡萄糖及47.34 g/L乙醇的环境，同时具备优良的产醇、产酯能力和乳糖利用能力，鉴定为马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)和库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。两菌株的生长曲线显示，对数期始于4 h，稳定期分别始于12 h和18 h；对峙试验证实菌株之间无拮抗作用可共生；碳源利用试验表明二者可利用葡萄糖、乳糖、蔗糖等7种碳源，适应性强。生物安全性检测显示，两菌株均无溶血性，对康唑类抗真菌药物敏感，符合食品发酵菌株的安全标准。电子鼻分析显示，两菌株以1:1混菌(HJ)发酵奶酒基质的烷烃、硫化物、醇类、醛酮类等风味物质的响应值显著高于单菌发酵组及对照组，主成分分析累计贡献率与线性判别分析累计判别率均达99.97%。感官评价实验显示，混菌(HJ)发酵的奶酒发酵彻底，且在外观、香气、口感和风格4个维度的评分均高于其他组合。结论 马克思克鲁维酵母J17与库德里阿兹威氏毕赤酵母J23兼具高耐受性、广谱碳源利用能力、良好的生物安全性及协同增香能力，具备奶酒专用发酵剂的开发潜力，可为传统奶酒发酵提供优质菌种资源。

摘要:餐厨垃圾中含有难降解油脂，易发生酸败，进而造成环境污染。目的 从餐厨垃圾中筛选高效产脂肪酶菌株，优化其产酶条件，并评价其胞外产物在餐厨垃圾中的油脂降解潜力。方法 采用中性红培养基从食堂泔水中分离筛选产脂肪酶菌株，并结合形态学特征及16S rRNA基因序列进行鉴定；通过单因素试验和响应面法优化脂肪酶产酶条件；分析脂肪酶性质及胞外聚合物(extracellular polymeric substances, EPS)的乳化性能。结果 从泔水样品中获得1株产脂肪酶能力强且具有生物表面活性的菌株C24202，鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)。响应面优化结果显示，其最佳发酵条件为：乳糖10.0 g/L、酵母膏7.5 g/L、乳化大豆油40.0 g/L、FeSO₄ 8.0 g/L、温度34 ℃、初始pH 6.5、培养72 h，此时脂肪酶活力达(229.64±2.17) U/mL，为优化前的2.55倍。该脂肪酶最适温度为60 ℃，在50 ℃下孵育6 h仍保留50.70%的活性。菌株产生的EPS具有良好的乳化性能，其EI₂₄值为46.92%，红外光谱分析表明其可能为聚合型糖脂肽类生物表面活性剂。结论 该菌株兼具产耐热脂肪酶和生物表面活性剂的能力，在油脂降解及含油废水处理领域具有良好的应用前景。

摘要:目的 挖掘适用于盐碱地生态修复的微生物资源，明确其抗逆性和促生特性，以期为基于生物技术的农业可持续发展提供理论依据。方法 以甘肃省民勤绿洲的3种典型盐生植物——多枝柽柳(Tamarix ramosissima)、黑果枸杞(Lycium ruthenicum)和盐爪爪(Kalidium foliatum)为研究对象，从其根际土壤中分离和筛选植物根际促生菌(plant growth-promoting rhizobacteria, PGPR)，并通过16S rRNA基因序列分析对优良菌株进行鉴定，系统评价其固氮、溶磷、分泌吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)、胞外多糖(exopolysaccharides, EPS)和铁载体的能力，以及耐盐、耐旱、酸碱适应性、温度适应性和对6种常见植物病原真菌的拮抗作用。结果 共分离获得62株细菌，从中筛选出7株多功能PGPR (HL3、HL6、HL12、HG3、HG8、HG12和HG24)，分别鉴定为线状普里斯特氏菌(Priestia filamentosa)、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)、内生泛菌(Pantoea endophytica)、耐寒近芽孢杆菌(Peribacillus frigoritolerans)、阿氏芽胞杆菌(Bacillus aryabhattai)、枯草芽孢杆菌粪便亚种(Bacillus subtilis subsp. stercoris)和皮尔瑞俄类芽孢杆菌(Paenibacillus peoriae)。筛选的菌株均兼具至少2种促生特性；其中HL6和HG24同时具备固氮、溶磷、产IAA、EPS和铁载体的能力。抗逆性评价表明，HL3和HL6可耐受12% NaCl，HL3和HG8可耐受-20 bar渗透胁迫；多数菌株适应pH 9.0及28-45 ℃温度范围。拮抗试验显示，HL6对全部6种病原真菌均有抑制作用，HG24对5种病原真菌具有广谱拮抗活性，二者对茄链格孢菌(Alternaria solani)抑菌效果最强。结论 本研究从干旱区盐生植物根际筛选获得的PGPR兼具显著促生与抗逆特性，可为盐碱地生物修复及本地化微生物菌剂的开发提供重要微生物资源支撑。

摘要:目的 从低氮磷处理的耐低氮磷水稻品种YTZ和耐低氮磷水稻回交子代品种H8的根系组织中分离并筛选出具有促生功能的水稻根际促生菌。方法 采用平板划线法分离纯化菌株；利用16S rRNA基因测序等方法进行菌种鉴定；通过解磷、固氮、产吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)等功能指标筛选促生菌株；对目标菌株进行全基因组测序分析，挖掘其功能基因，揭示其分子机制。通过盆栽试验测定根际相关土壤理化性质，探究目标菌株对水稻苗期氮、磷吸收效率的促进作用；利用16S rRNA基因扩增子测序分析其对水稻根际微生物群落结构的影响，结合菌群构建及菌群载体效果评价探索菌剂的应用潜力。结果 共筛选出7株具有解磷、固氮能力的菌株，并对其IAA产生能力进行定量分析，最终筛选出5株具代表性的菌株进行盆栽试验。其中，高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis) Hxx04的促生效果最为显著，使水稻植株鲜重增加47.2%，株高增加48.6%，显著提升了水稻苗期氮、磷吸收效率。根际土壤中全氮、碱解氮、全磷及有效磷含量均显著降低，表明目标菌株促进了水稻对氮磷养分的吸收。群落分析显示，接入目标菌株后根际群落呈现高丰度分布，为水稻生长提供了氮素营养支持。在以B. altitudinis Hxx04为核心菌株的两两联合接种(双菌组合)评估中“膨润土+秸秆”载体组合效果最佳。结论 菌株B. altitudinis Hxx04能高效利用氮磷并显著促进水稻生长，使水稻在鲜重和株高方面均有显著提升，同时减少了对化肥的依赖，兼具增产与环境保护效益。本研究为绿色农业提供了新的微生物资源与理论支持，有助于实现水稻氮磷高效利用与生态环境保护的协同目标。

摘要:目的 筛选兼具广谱拮抗活性和水果采后保鲜功能的微生物源挥发性有机物(volatile organic compounds, VOCs)产生菌株。方法 以广西野生茶树根系和枝条内生细菌为研究对象，采用稀释涂布平板法分离纯化内生细菌。通过纤维素酶、淀粉酶、铁载体、有机磷、无机磷及固氮等6类功能培养基进行筛选，依据功能特性数量初步筛选候选菌株；采用平板对峙法测定菌株对7种常见通用植物病原真菌的拮抗活性，筛选广谱拮抗菌株。进一步选取综合性能较优的菌株，针对芒果和芭蕉炭疽病原菌——果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)和芭蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)进行拮抗评价，并以化学保鲜剂咪鲜胺为对照开展离体香蕉保鲜试验。结果 功能培养基初筛共获得98株同时具备固氮、溶磷、产铁载体等4种及以上促生或抗逆功能特性的菌株。以7种常见植物病原真菌为靶标进行平板对峙复筛得到18株对至少5种病原菌具有显著抑制作用的广谱拮抗菌株，其中4株对全部7种病原菌均表现出稳定且较强的拮抗活性。在此基础上，综合考量功能特性数量和广谱抑菌率2项核心指标，最终遴选出5株综合性能最优的菌株，用于后续针对芒果/芭蕉炭疽病原菌的特异性拮抗评价及果实保鲜效果验证。平板对峙试验中5株菌株对2种炭疽病原菌的抑菌率为43.36%-83.50%；平板对扣试验显示，其产生的VOCs对果生炭疽菌和芭蕉炭疽菌的抑菌率分别为56.80%-99.25%和54.50%-99.85%，部分菌株对2种病原菌均表现出接近100.00%的强抑菌活性。离体果实保鲜试验结果表明，拮抗菌株产生的VOCs均能不同程度延缓芒果和香蕉的腐烂进程，其中菌株T-1-6保鲜效果最为突出，可将香蕉明显腐烂时间延长至21 d，末期腐烂等级为0级，其保鲜效果与化学保鲜剂咪鲜胺相当，对芒果表面霉菌的防效约为50%。16S rRNA基因和gyrB基因序列分析表明，5株优势拮抗菌株均隶属于芽孢杆菌属(Bacillus)，包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等。结论 本研究从茶树根系和枝条内生细菌中获得了一批具有多功能特性和广谱拮抗活性的VOC_S产生菌株，为芒果、香蕉等热带水果采后病害的绿色防控与生物保鲜技术开发提供了潜在优良菌种资源和理论依据。

摘要:土壤养分缺乏是影响作物产量的主要限制因素。化肥过量使用会导致土壤板结、环境污染以及农产品质量下降。微藻肥作为一种新型绿色生物肥料，在多种逆境土壤条件下均可有效促进作物生长并提升土壤肥力。目的 探究不同类型肥料配施对贫瘠土壤下谷子生长、土壤理化性质、土壤酶活性及微生物群落特征的影响，为微藻肥在化肥减量及绿色可持续生产中的应用提供理论支撑。方法 供试谷子品种为‘晋谷21’。采用土培试验，设置全化肥组(T1)、微藻肥耦合化肥减施组(T2：80%化肥+20%微藻肥；T3：60%化肥+40%微藻肥；T4：40%化肥+60%微藻肥)、全藻肥组(T5)共5种处理组。在谷子生长90 d后测定各处理组谷子的生长指标、生物量、色素含量，检测土壤的理化性质和土壤酶活性，以及土壤细菌群落特征指标。结果 在5种肥料处理中，微藻耦合化肥处理(T4)对贫瘠土壤下谷子的促生效果最为明显。相较于全化肥处理(T1)，在贫瘠土壤条件下T4处理组谷子幼苗株高提高了26.41%，地上部干重增加了126.47%，叶绿素a、叶绿素b与类胡萝卜素含量分别升高了17.1%、24.5%与28.0%。与全化肥(T1)相比，施用全藻肥(T5)和微藻肥耦合化肥减施(T2、T3、T4)增加了土壤全氮、有效磷、有机质的含量，提高了土壤蔗糖酶、硝酸还原酶、过氧化氢酶、磷酸酶的活性，且T4处理组对土壤的改良效果最显著。进一步对土壤微生物16S rRNA基因扩增子测序分析表明，与单一施肥处理(T1、T5)相比，T4处理提高了土壤微生物的多样性，酸杆菌门(Acidobacteriota)和绿屈挠菌门(Chloroflexi)的相对丰度显著增高。同时，相关性分析显示土壤微生物多样性组成与脲酶呈显著正相关，土壤细菌群落组成与有效磷、蔗糖酶、过氧化物酶和脲酶呈显著正相关。冗余分析(redundancy analysis, RDA)显示脲酶和有效磷是影响土壤细菌群落结构的主要环境因素。其中，绿屈挠菌门相对丰度与脲酶和有效磷呈显著正相关。结论 藻肥耦合化肥减施处理可有效提高土壤养分含量及土壤酶活性，同时改善土壤微生物多样性及群落结构，进而促进贫瘠土壤下谷子幼苗的生长。

摘要:目的 探究分离自青藏高原干旱沙地的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) DGL1对干旱胁迫下燕麦(Avena sativa)的促生特性及机制，以期为适用于干旱地区的菌肥研发提供优质菌源和理论基础。方法 测定干旱胁迫下菌株DGL1对燕麦根长、株高、鲜重的促生效果，测定燕麦在干旱胁迫下的细胞膜过氧化程度及抗氧化酶活性，并利用高通量测序技术对菌株DGL1进行全基因组测序和转录组学测序。结果 研究发现DGL1显著增加了干旱胁迫下燕麦的根长、株高和鲜重，显著提高了燕麦抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、过氧化物酶(peroxidase, POD)的活性，降低了丙二醛和H₂O₂的含量。全基因组测序表明，DGL1具有谷胱甘肽过氧化物酶编码基因gpx、甘氨酸甜菜碱转运蛋白编码基因OpuD、烷基过氧化氢还原酶编码基因ahpF等与氧化应激相关的基因，还具有IAA前体l-色氨酸基因trpA、trpB、trpC等，以及鞭毛生物合成蛋白编码基因FliP、FliQ、FliR等。此外，通过转录组测序发现，干旱胁迫下与根定殖相关的生物膜形成、氮磷吸收利用及物质能量代谢、生长素前体合成等相关基因均上调表达，菌株可能通过这些途径增强了植物对干旱胁迫的耐受能力。结论 菌株DGL1能够增强燕麦对干旱的适生性，具有在旱地研发生物制剂的潜能。

摘要:四翅滨藜是荒漠抗逆先锋树种，也是肉苁蓉主要寄主，在内蒙古乌兰布和沙漠地区广泛种植。根际及内生微生物在植物生长发育和抗逆境过程中发挥重要作用。然而，关于内蒙古乌兰布和沙漠地区四翅滨藜根际与内生微生物的促生功能研究尚较为匮乏。目的 筛选内蒙古乌兰布和沙漠地区四翅滨藜根际及内生细菌中的促生菌株，为该地区四翅滨藜的可持续繁育提供微生物菌种资源。方法 从内蒙古磴口县乌兰布和沙漠采集四翅滨藜根际土和植株样品，分离纯化四翅滨藜根际和内生细菌，探究这些细菌与课题组前期得到的黄芪促生细菌对四翅滨藜幼苗的促生效果，对具有显著促生效果的菌株进行分子生物学鉴定和促生功能分析，然后对这些菌进行复配组合构建人工复合菌群，并检测复合菌群对四翅滨藜的促生效果。结果 共分离得到60株四翅滨藜根际细菌和14株内生细菌，其中2株内生细菌具有显著促生作用，检测的黄芪促生菌中有3株菌对四翅滨藜具有显著促生作用。5株促生细菌分属于3个属和4个种，包括假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)和不动杆菌属(Acinetobacter)。这些促生菌株均具有不同水平的固氮、解无机磷、解有机磷、解钾长石、解硅酸铝钾、产吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)和产生物膜的能力，大多数菌株具有产铁载体的能力。人工复合菌群中多个组合均具有促进效果，组合2 (IH-2、IH-9、TYA27)、3 (IH-2、IH-9、PAS13-2)和4 (IH-2、TYA39、TYA27)综合促生效果最好，毕节假单胞菌(Pseudomonas bijieensis) IH-2为核心菌株。结论 乌兰布和沙漠地区四翅滨藜的促生菌主要包括假单胞菌属(Pseudomonas)和芽孢杆菌属(Bacillus)，毕节假单胞菌(P. bijieensis)在促生复合菌群中起核心作用。

摘要:目的 探究地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) ZXT的不同固定化策略及矿化方式对高氮磷废水的脱氮除磷效能，明确最优矿化条件与载体作用机制，为养猪废水等复杂高氮磷废水的绿色处理与资源回收提供技术支撑。方法 对比游离菌、化学沉淀、活性炭纤维(activated carbon fiber, ACF)固定化、聚乙烯醇-海藻酸钠-炭粉(polyvinyl alcohol-sodium alginate-carbon powder, PVA-SA-CP)固定化4种体系在Mg:N:P为0.6:1:1、1:1:1、1.4:1:1比例下的矿化效果，结合X射线衍射、扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱等表征手段解析矿物特性，通过实际养猪废水验证体系应用潜力。结果 ACF固定化体系效能最优，在Mg:N:P=1:1:1比例下培养7 d，NH₄⁺终浓度仅0.59 mg/L (去除率99.81%)，PO₄^3-终浓度低至0.03 mg/L (去除率99.99%)，均满足国标GB 8978—1996排放标准，且生成结晶规整的长板状鸟粪石(即磷酸铵镁，magnesium ammonium phosphate, MAP)；PVA-SA-CP固定化体系同比例下NH₄⁺、PO₄^3-终浓度分别为5.07 mg/L、0.45 mg/L，去除效果显著较弱；化学沉淀法24 h内NH₄⁺终浓度为38.90-48.01 mg/L (去除率84.70%-87.61%)，未达标。游离菌处理实际养猪废水时，培养8 d NH₄⁺、PO₄^3-去除率分别达99.97%、99.92%，终浓度为0.15 mg/L、0.05 mg/L，符合排放要求。结论 ACF凭借发达的微孔结构与良好的生物相容性，可高效富集菌体并促进胞外聚合物规整组装，其固定化地衣芽孢杆菌ZXT的矿化技术为最优选择，Mg:N:P=1:1:1为最佳矿化比例，该技术可实现高氮磷废水的高效净化与氮磷资源回收，在实际废水处理中具有重要应用价值。

摘要:目的 根际微生物群落对植株生长发育和品质形成具有重要调控作用。因此，本研究旨在系统分离柴胡(Bupleurum chinense DC.)根际促生微生物资源，评价其应用潜力，为开发微生物菌肥、减少化肥和农药投入提供优良菌株。方法 采用传统分离培养方法，从柴胡根际分离鉴定植物根际促生细菌(plant growth-promoting rhizobacteria, PGPR)和丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)；通过体外功能试验筛选高效PGPR菌株，并在盆栽条件下评估PGPR和AMF的协同促生效应。结果 从柴胡根际共分离获得25种PGPR，以及摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)和幼套内养囊霉(Entrophospora etunicata) 2种AMF。PGPR的功能筛选结果表明，抗生素溶杆菌(Lysobacter antibioticus)、德国鸢尾假单胞菌(Pseudomonas germanica)、类棒杆菌红球菌(Rhodococcus corynebacterioides)和地钱甲基杆菌(Methylobacterium marchantiae)分别在吲哚乙酸分泌、有机磷溶解、无机磷溶解和固氮方面表现突出。盆栽试验显示，PGPR和AMF联合接种显著促进柴胡植株生长、生物量积累和养分吸收，其促生效应明显优于单一接种处理。结论 本研究挖掘并鉴定了一些柴胡根际关键促生微生物资源，明确了PGPR和AMF之间的协同促生效应，为柴胡绿色高效栽培提供了可利用的菌剂资源和理论依据。

摘要:目的 皮脂代谢紊乱是多种皮肤疾病的重要诱因，后生元作为一种新兴的微生态制剂显示出调控代谢的潜力。本研究旨在探究副干酪乳酪杆菌CCFM1224后生元对皮脂代谢紊乱的改善作用及其机制，并进一步探索后生元起效组分。方法 通过构建油酸诱导的小鼠皮脂代谢紊乱模型，从表观指标、激素指标、皮肤脂质含量水平综合评价CCFM1224后生元对皮脂紊乱的改善效果，并检测皮肤脂质代谢相关基因表达变化。利用游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂质堆积模型对后生元功效组分进行筛选。结果 CCFM1224后生元能显著缓解小鼠皮脂代谢紊乱导致的体重异常增长与睾丸系数增大，减轻皮肤组织病理损伤，降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平，并下调皮肤组织中甘油三酯(triglyceride, TG)及游离脂肪酸(non-esterified fatty acid, NEFA)含量。机制研究表明，CCFM1224后生元通过抑制脂质合成基因(FASN、PPAR-γ、SREBP-1c)的表达，促进脂质分解基因(PPAR-α、HSL、ATGL)的表达，从而调节皮脂代谢。细胞实验表明，CCFM1224后生元灭活菌体成分能够显著减轻细胞脂质积累及相关损伤，说明其为CCFM1224后生元发挥功效的主要活性组分。结论 副干酪乳酪杆菌CCFM1224能够通过调节激素分泌以及脂质代谢途径缓解皮脂代谢紊乱，其关键功效物质为灭活菌体组分而非发酵上清液。本研究为后生元在脂质代谢紊乱调控中的应用提供了理论依据，也为相关功能性微生物制剂的开发奠定了研究基础。

摘要:目的 获取可降解聚苯乙烯(polystyrene, PS)和聚丙烯微塑料(polypropylene, PP)的微生物菌群，解析其降解效能与协同机制，为二者原位生物修复提供资源与理论支撑，深化对菌群协同降解复杂污染物机制的理解。方法 从受塑料污染的企业活性污泥中富集可降解PS和PP的微生物菌群；通过60 d降解实验，结合质量损失率评估菌群对2种微塑料的降解效果；利用扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)、水接触角(water contact angle, WCA)、凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography, GPC)等技术表征微塑料的表面结构、疏水性及分子量变化；借助傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy, FTIR)与气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析微塑料的降解产物及代谢途径；通过宏基因组分析明确菌群的优势类群、核心功能菌及其编码的相关酶，探究菌群协同降解机制。结果 富集菌群以芽孢杆菌门和假单胞菌门为优势类群，芽孢杆菌属启动初始降解，无色杆菌属参与中间代谢，形成“启动-代谢”协同网络；60 d内无需预处理即可降解PS和PP，质量损失率分别达(13.4±2.3)%和(23.2±2.4)%；表征证实微塑料表面被破坏、疏水性降低、分子量下降；FTIR与GC-MS揭示PS经苯环羟基化等生成酚类和醛类，通过芳香族途径进入三羧酸循环(TCA循环)，PP经“羟基化→羰基化→酯化”氧化链，通过脂肪酸代谢途径；宏基因组功能注释显示，芽孢杆菌属与无色杆菌属基因编码的初始降解酶、代谢酶功能互补，构成高效降解的分子基础。结论 本研究发现的微生物菌群可高效降解PS和PP，推测其核心功能菌芽孢杆菌属和无色杆菌属通过“启动-代谢”的协同网络及功能互补的酶系实现对2种微塑料的降解，为源头控制后残留微塑料的治理提供参考，同时加深了对菌群协同降解复杂污染物机制的认识。

摘要:目的 硫酸软骨素裂解酶是制备低分子量硫酸软骨素的关键工具，但现有酶制剂难以满足多样化应用需求，因此需要发掘更多新型硫酸软骨素裂解酶。方法 从模式菌株变铅青链霉菌TK24中发现并鉴定了一种新型PL8家族硫酸软骨素裂解酶SlChase。经大肠杆菌异源表达与纯化后，获得可溶性的高活性SlChase重组酶。结果 该酶在30-40 ℃、pH 5.5-6.5范围内均保持较高活性，在4 ℃具有良好的长期稳定性；Mg²⁺与二硫苏糖醇(dithiothreitol, DTT)可轻微促进其活性，而Zn²⁺、Fe³⁺等金属离子则对该酶活性具有抑制作用。值得注意的是，SlChase对非硫酸化软骨素(CS-0S)表现出较好活性，对硫酸软骨素A/C的活性则显著降低。结论 SlChase的发现不仅丰富了PL8家族多糖裂解酶的多样性，也为非硫酸化软骨素的特异性降解提供了新型工具酶，在糖生物学研究及相关生物催化领域具有潜在应用价值。同时，SlChase的发现也为链霉菌酶学资源的开发利用提供了新的范例。

摘要:近几十年来，由于抗生素广泛使用甚至滥用，抗生素耐药(antimicrobial resistance, AMR)细菌对人类健康构成巨大威胁。噬菌体疗法在防治耐药细菌感染方面具有巨大潜力，已成为新的研究热点。然而，噬菌体抗性细菌的快速出现使得噬菌体疗法的疗效难以保障，“噬菌体转向”策略有望解决这一难题。目的 分离适用于“噬菌体转向”疗法的沙门氏菌(Salmonella)烈性噬菌体。方法 以Salmonella S503作为宿主菌，利用双层平板法从农贸市场污水样品中分离纯化烈性噬菌体，分析该噬菌体的基本生物学特性、抑菌能力、基因组信息及体外生物安全性；利用细菌-噬菌体共培养法分离出噬菌体抗性菌株并进行验证，随后采用生长曲线测定、细菌毒力测试和抗生素敏感性测试等实验，系统比较野生型菌株和噬菌体抗性菌株的特性差异。结果 将分离得到的1株沙门氏菌烈性噬菌体命名为HK-1，该噬菌体抑菌能力强、稳定性好，且在体外具有良好的生物安全性。与野生型菌株Salmonella S503相比，噬菌体抗性菌株Salmonella S503-R生长速度放缓，毒力显著降低，对11种抗生素的敏感性增强。噬菌体HK-1与利福平、氨苄西林、磷霉素和庆大霉素存在协同杀菌作用，其中噬菌体分别与氨苄西林、磷霉素和庆大霉素联用均能在24 h内完全抑制Salmonella S503的生长。结论 本研究从污水样品中分离得到1株沙门氏菌烈性噬菌体，该噬菌体适用于“噬菌体转向”疗法，可用于AMR沙门氏菌的防治。

摘要:目的 将CRISPR系统与杂交链式反应(hybridization chain reaction, HCR)结合，构建一种用于副溶血性弧菌快速检测的荧光方法，以实现对病原菌的快速、灵敏、准确检测。方法 筛选副溶血性弧菌特异性保守序列，设计级联探针(RP/I)及HCR发夹结构，优化反应体系及实验条件，评估该方法的可行性、灵敏度和特异性，并利用副溶血性弧菌污染的水产品验证其抗干扰能力。结果 仅当靶标存在时，CRISPR/Cas13a才能被激活，反式切割RP/I级联探针，释放出I链并引发HCR反应，产生明显的荧光增强信号。该方法具有良好的检测特异性，可区分单碱基错配、双碱基错配和三碱基错配，并能针对不同菌株有效区分副溶血性弧菌与非靶标菌(如溶藻弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌、霍乱弧菌和大肠杆菌)。基于纯靶标RNA的检测灵敏度为1.01 pmol/L，在25 pmol/L-10 nmol/L具有良好的线性关系，其回归方程为y=7 236.75×lg C_T-RNA-8 590.11，R²=0.99。本研究方法可快速检测多种水产品中副溶血性弧菌提取的RNA，检测结果与实时荧光定量逆转录PCR (real-time reverse transcription quantitative PCR, RT-qPCR)一致。结论 本研究建立的CRISPR/Cas13a-HCR荧光检测方法可快速、准确地检测副溶血性弧菌，且具有良好的灵敏度、特异性和准确性。