摘要:【目的】旨在探究硫酸亚铁(FeSO4)对缺铁性贫血(iron deficiency anemia, IDA)小鼠肠道健康的影响。【方法】选取45只24日龄体重(16.0±1.2) g的雄性昆明小鼠，随机分成3组，每组15只，即对照组(正常饲料，饮蒸馏水)、IDA组(低铁饲料造模2周，饮去离子水)、IDA-Fe2+组(造模结束后灌胃FeSO4 3周，饮去离子水)，实验结束时采样。【结果】试验结束时，与IDA组相比，IDA-Fe2+组小鼠的红细胞、血红蛋白、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度等贫血指标均恢复至正常水平(P>0.05)，表明FeSO4具有改善IDA的功能；与对照组相比，IDA和IDA-Fe2+组小鼠的氧化应激指标和肿瘤坏死因子α均显著升高(P<0.01)、紧密连接蛋白Occludin显著降低(P<0.001)，IDA-Fe2+组与IDA组除结肠总抗氧化能力(TAC)外均无差异显著性(P>0.05)。结肠组织HE染色结果表明：与对照组相比，IDA组小鼠的结肠组织黏膜层萎缩，黏膜层上皮细胞排列缺损，固有层萎缩。灌胃FeSO4 3周后，观察到IDA-Fe2+组小鼠黏膜层上皮细胞排列仍有缺损，黏膜层腺泡部分存在坏死与缺损，固有层萎缩。对粪便微生物群进行的Illumina MiSeq高通量测序结果表明，IDA会导致小鼠肠道菌群紊乱，菌群多样性指数显著改变(Shannon、Chao1、Ace和Simpson指数，P<0.05)；灌胃FeSO4后，相较于IDA组，IDA-Fe2+组小鼠菌群多样性指数显著增加、肠道菌群的整体结构显著改善(P<0.05)；在门水平上，Bacteroidetes显著降低(P<0.05)，Verrucomicrobia显著升高(P<0.01)，均恢复至正常水平；在属水平上，改变了主要优势菌属的丰度，有益菌Akkermansia、Coprobacter丰度显著增加(P<0.05)，致病菌Parabacteroides丰度显著降低(P<0.01)。【结论】FeSO4可以通过改善IDA小鼠的血液指标来缓解IDA症状，但对IDA小鼠的结肠氧化应激指标、炎症指标和结肠组织病变情况没有改善作用。补充FeSO4可以增加IDA小鼠肠道菌群多样性和优势菌群丰度，使有益菌丰度增加，致病菌丰度降低。

摘要:[目的]圣路易斯脑炎病毒（St.Louis encephalitis virus，SLEV）属于黄病毒科，是一种单股正链RNA病毒。黄病毒编码的非结构蛋白NS3在病毒复制以及多聚蛋白加工过程中起着重要作用，NS2B是其发挥作用的重要辅助因子。因此，NS2B-NS3蛋白酶复合物是抗病毒药物的重要靶标。本研究旨在构建SLEV NS2B-NS3蛋白酶的原核表达系统并建立其抑制剂的高通量筛选方法，从而发现其小分子抑制剂。[方法]通过PCR扩增SLEV NS2B-NS3蛋白的编码区，构建原核表达质粒；在大肠杆菌BL21（DE3）中，经异丙基硫代半乳糖苷（Isopropyl β-D-thiogalactoside）诱导得到可溶性的NS2B-NS3蛋白，并用镍亲和层析方法进行纯化；基于荧光共振能量转移（Fluorescence resonance energy transfer）技术检测NS2B-NS3蛋白酶活性，建立其抑制剂的高通量筛选平台。[结果]SLEV NS2B-NS3蛋白酶纯化程度高达95%以上，基于酶活测定的抑制剂筛选平台准确可行。对700多个上市药物进行筛选后，发现原花青素对SLEV NS2B-NS3蛋白酶具有明显的抑制活性。[结论]本研究为SLEV NS2B-NS3蛋白酶抑制剂提供了一种操作方便、高通量的筛选方法，并首次发现了原花青素具有抑制SLEV NS2B-NS3蛋白酶活性的功能，可以作为治疗SLEV感染的潜在靶向药物。