摘要:摘要:探讨大肠杆菌ompW基因敲除后，硫酸新霉素和氨苄青霉素对敲除菌最低抑菌浓度(MIC)和生存率的影响，进而分析OmpW 的功能。【方法】运用Red 重组技术将大肠杆菌K12 染色体上基因ompW 敲除，构建缺陷株ΔompW。然后分别测定硫酸新霉素和氨苄青霉素对正常菌和ΔompW 菌的最小抑菌浓度(MIC)及次抑菌浓度(1/2 MIC)下K12 和ΔompW 菌的生存率。【结果】经PCR 鉴定和通过提取膜蛋白进行western blot分析表明，成功获得ompW 敲除菌。抗生素分析表明，K12 菌对硫酸新霉素的MIC 为8.0μg/mL，生存率为98.0%;ΔompW菌对新霉素的MIC为1.7μg/mL，而其生存率仅为39.0%。而k12对氨苄新霉素的MIC为16.0μg/mL，ΔompW为3.3μg/mL;1/2MIC下K12生存率为70.4%，而ΔompW 为30.3%。【结论】ompW基因缺陷株对两抗生素的敏感性大大增强，表明ompW 在细菌抗性方面起着关键作用。