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    • 腺病毒介导犬干扰素-γ基因的表达及其体外抗犬细小病毒的作用

      2012, 52(11):1340-1407.

      关键词:关键词:干扰素-γ,腺病毒载体,抗病毒活性,犬细小病毒
      摘要 (1084)HTML (0)PDF 1.56 M (1015)收藏

      摘要:摘要:【目的】构建含犬干扰素-γ(cIFN-γ)基因的重组腺病毒,并在培养的犬肾细胞MDCK 中分析其抗犬细小病毒的活性。【方法】首先将cIFN-γ cNDA 基因克隆到腺病毒穿梭质粒中,构建成含cIFN-γ 基因的腺病毒穿梭质粒pShuttle3-cIFN-γ。利用特异的酶切位点,通过直接连接法将cIFN-γ表达盒插入到腺病毒基因组质粒pAdeno-X 中,构建成含cIFN-γ 基因的腺病毒基因组质粒pAd-cIFN-γ。pAd-cIFN-γ质粒经酶切线性化后转染人胚胎肾细胞HEK293T,在细胞中拯救出含有cIFN-γ 基因的复制缺陷型重组腺病毒。然后用该重组腺病毒处理(感染)培养的犬肾细胞MDCK,再用犬细小病毒感染重组腺病毒处理的细胞,分析重组腺病毒在体外抗犬细小病毒的活性。【结果】通过连接法构建了含cIFN-γ基因的重组腺病毒,构建的重组腺病毒能够介导cIFN-γ在MDCK 细胞中进行分泌表达。用含cIFN-γ 基因的重组腺病毒处理MDCK 细胞,可明显地抑制犬细小病毒在细胞中的增殖,表明构建的重组腺病毒具有明显的抗犬细小病毒的活性。【结论】构建了含cIFN-γ 基因的重组腺病毒,并证明该重组病毒在体外具有明显的抗犬细小病毒的活性。

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