摘要:摘要：【目的】构建携猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp）黏附因子p97 C末端基因的重组腺病毒并研究其诱导小鼠产生的免疫反应，为研制新型Mhp疫苗奠定基础。【方法】从Mhp基因组中扩增p97 C末端基因，并将其克隆到穿梭载体pShuttle-CMV中，该重组穿梭质粒经Pme I线性化后电转化到BJ5183-AD-1细胞中进行同源重组获得重组腺病毒DNA，纯化后的重组腺病毒质粒经Pac I酶切线性化后转染AD293细胞以获得重组腺病毒。对该重组腺病毒进行RT-PCR、间接

摘要:鸡新城疫是由新城疫病毒引起的鸡的一种急性、烈性、高度接触性传染病,是危害养禽业的最严重疫病之一。控制新城疫最根本的措施是进行有效的疫苗接种,目前常用的疫苗是弱毒活疫苗和灭活疫苗,但二者在实际应用中均存在一定的局限性。口服微球疫苗可以诱导较强的粘膜免疫;同时还能够诱导产生系统的体液免疫和细胞免疫,已成为ND疫苗研究的热点。以壳聚糖为囊材,新城疫La Sota抗原液为芯材,戊二醛为交联剂,制备出新城疫壳聚糖微球疫苗,通过了实验室安全检验和效力检验。将新城疫壳聚糖微球疫苗与LaSota活疫苗和新城疫油乳剂灭活苗分别免疫SPF鸡,利用MTT、血凝抑制法(HI)和ELISA等分别检测不同疫苗免疫后的细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫抗体IgA,并在当免疫鸡HI抗体降到23的情况下进行了攻毒试验。结果表明,新城疫壳聚糖微球疫苗安全性好,免疫后可刺激机体产生较强的细胞免疫、体液免疫和局粘膜免疫,具有较好的保护作用。

摘要:鸡新城疫是由新城疫病毒引起的鸡的一种急性、烈性、高度接触性传染病,是危害养禽业的最严重疫病之一。控制新城疫最根本的措施是进行有效的疫苗接种,目前常用的疫苗是弱毒活疫苗和灭活疫苗,但二者在实际应用中均存在一定的局限性。口服微球疫苗可以诱导较强的粘膜免疫;同时还能够诱导产生系统的体液免疫和细胞免疫,已成为ND疫苗研究的热点。以壳聚糖为囊材,新城疫La Sota抗原液为芯材,戊二醛为交联剂,制备出新城疫壳聚糖微球疫苗,通过了实验室安全检验和效力检验。将新城疫壳聚糖微球疫苗与LaSota活疫苗和新城疫油乳剂灭活苗分别免疫SPF鸡,利用MTT、血凝抑制法(HI)和ELISA等分别检测不同疫苗免疫后的细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫抗体IgA,并在当免疫鸡HI抗体降到23的情况下进行了攻毒试验。结果表明,新城疫壳聚糖微球疫苗安全性好,免疫后可刺激机体产生较强的细胞免疫、体液免疫和局粘膜免疫,具有较好的保护作用。

摘要:摘要：【目的】比较和评价了敲除meq基因的MDV感染性克隆作为新型DNA疫苗的免疫保护效果。【方法】将1日龄SPF鸡饲养于正压过滤空气的SPF动物饲养隔离罩内。1日龄时，将SPF鸡以10 μg /只的剂量通过大腿肌肉注射的方式接种溶解于PBS缓冲液中的敲除meq基因的MDV感染性克隆GX0101Δmeq-BAC，分别在免疫后5天或12天以500 PFU/只的剂量接种超强毒rMd5。饲养90天，观察死亡情况，对每一只鸡剖检并取心脏与肝脏做石蜡切片，进行病理观察。【结果】免疫5天后攻毒，CVI988/Risp

摘要:目的 研制禽致病性大肠杆菌菌影负载鸭源鸡杆菌flfA基因的核酸疫苗，并评估其在鸡体内的免疫保护效果。方法 以鸭源鸡杆菌的菌毛基因flfA为目的基因，采用携带鸡β肌动蛋白启动子的pCAGGS-HA质粒作为表达载体，构建pCAGGS-flfA真核表达质粒；构建温控质粒PBV-E-SN，并将其转化至对氨苄青霉素敏感的禽致病性大肠杆菌分离株制备菌影；将pCAGGS-flfA质粒装载入菌影制备菌影疫苗，设计菌影负载pCAGGS-flfA质粒组、pCAGGS-flfA质粒组、空菌影组、PBS组及正常对照组。对7日龄雏鸡进行首次免疫，首免2周后二次加强免疫，首免4周后对鸡进行鸭源鸡杆菌攻毒试验，检测疫苗的免疫保护效果。结果 所构建的真核表达质粒pCAGGS-flfA能在体外细胞中成功表达；构建的禽致病性大肠杆菌菌影菌株在42 ℃热诱导210 min后，裂解率达到99.94%；免疫保护试验结果显示，无论是通过ELISA检测的特异性IgG抗体水平，还是对鸡泄殖腔拭子和咽拭子的排菌情况以及组织脏器中细菌载量的测定，菌影负载pCAGGS-flfA质粒组的免疫保护效果均显著高于其他免疫组，包括单独免疫pCAGGS-flfA质粒组。与单独免疫pCAGGS-flfA质粒组相比，菌影负载pCAGGS-flfA质粒组的免疫保护效果更为优越。结论 本研究表明菌影作为pCAGGS-flfA的负载载体显著增强了该核酸疫苗的免疫保护效果。