摘要:摘要:【目的】分析spoIIID 基因突变对苏云金芽胞杆菌cry1、cry3、cry4 和cry8 基因启动子Pcry1Ac、Pcry3A、Pcry4A 和Pcry8E 的影响，比较以上启动子在无芽胞spoIIID 基因突变体(HD-!SpoIIID)中的转录活性。【方法】分别构建了Pcry1Ac、Pcry3A、Pcry4A和Pcry8E与lacZ基因融合的转录分析载体，并导入HD-73 野生型菌株和HD-!SpoIIID 突变株中测定-半乳糖苷酶活性;通过高温诱变方法在HD-!SpoIIID 基础上筛选出缺失cry1Ac 基因的HD－ -!SpoIIID 突变体;构建了4 种启动子与cry1Ac 基因融合表达载体，分别将它们转入HD-ΔSpoIIID 和HD － -ΔSpoIIID 中，分析Cry1Ac 蛋白表达量及其生物活性。【结果】HD-73 和HD-ΔSpoIIID 菌株中四个启动子转录活性由高到低分别为:Pcry8E ＞ Pcry1Ac ＞ Pcry4A ＞ Pcry3A;spoIIID 基因的缺失未影响Pcry1Ac 和Pcry8E 转录活性，Pcry3A 在HD-ΔSpoIIID 菌株中转录活性略有升高，Pcry4A 在HD-ΔSpoIIID 菌株中转录活性在T5到T10略有降低。从翻译水平来看在HD-ΔSpoIIID 中cry8E 启动子略低于cry1Ac 启动子，并高于Pcry4Aa，Pcry3A 指导的Cry1Ac 蛋白产量，生物活性测定结果与蛋白表达量相符。【结论】cry8E基因启动子Pcry8E 在spoIIID 突变体中在转录水平活性是最高的启动子，而cry1Ac 启动子指导自身基因cry1Ac 表达时，在翻译水平上略高于cry8E 启动子指导的Cry1Ac产量。