摘要:采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法 ,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA。所获得纯品DNA的产量为每克样品 2～ 1 6μg。对纯品DNA进行限制性内切酶处理后 ,构建了以pUC1 8为载体的DNA文库。建库效率为从每克环境样品获得约 1 0 3～ 1 0 4 个含 3～ 8kb外源随机插入片段的克隆。通过DNA序列测定和基因注释 ,对从文库中随机选取的克隆进行了分析 ,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因。本文所做的尝试对于保存、研究和开发未培养微生物基因资源具有意义

摘要:从自然罹病死亡的草原毛虫(Gynephorap ruoergnesis)体内分离到一株产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes),它在几丁质的诱导下能产生较高活性的几丁质酶。发酵液经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析分离出几丁质酶。用SDSPAGE测得该酶的分子量为425kD。水解几丁质的Km值为2.88mg/mL-1。酶反应的最适温度为55℃，最适pH值为60，金属离子对几丁质酶活性影响较大，其中Zn2+、Ba2+、Ca2+和Mn2+对酶有较强的激活作用，而Hg2+、Co2+和Mg2+则有较强的抑制作用。

摘要:为了提取小球藻病毒基因组DNA，探索利用3%～10%的PEG8000加3%～7%的NaCl沉淀病毒。其中以7%的PEG和4%的NaCl沉淀效果最好，但其沉淀效率较低。

摘要:甲基营养菌WB１菌株在以甲胺磷作碳氮源的无机盐培养基上生长时，产生甲胺磷降解酶情况较好，培养20 h为细胞收获的适宜时期。所得细胞经过超声波破碎、吐温20抽提、热处理(60℃,9min),DEAE|纤维素32和CM|纤维素32柱层析等步骤，得到的酶制品比活力为180U/mg，收率78.8%，纯化倍数22.8。纯化的酶制品经连续聚丙烯酰胺凝胶电泳，呈现一条主带，酶活力染色则呈现一条与之对应的活性谱带；该酶催化反应的适宜pH为90，底物专一性不强，Hg2+,Mn2+,Cu2+对酶有强烈的抑制作用。部分纯化酶制品在-20℃(0.1mol/L的磷酸盐溶液中)存放5d，酶活力丧失约60%。

摘要:华丽曲霉(Aspergillus ornatus)Z58有机磷农药降解酶经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G100凝胶过滤、DEAE52离子交换层析得到了分离纯化，用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定为单一组分。凝胶过滤法测得分子量为67 000，提纯倍数为34.2，收率为17.8%。该酶的最适反应温度45℃，最适反应pH72，对热较稳定，并且能在pH6～10范围保持活性。重金属Cu2+对该酶具有明显的促进作用，而SDS对酶具有抑制作用。此酶对所试的有机磷农药都有较好降解作用。

摘要:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM9602产生的中性内切β甘露聚糖酶(endoβ1,4Dmannan mannanohydrolase,EC,3.2.1.78)经硫酸铵分级沉淀、DEAE纤维素(DE22)离子交换柱层析，得到电泳纯的样品，提纯了455倍，收率为59%。用SDSPAGE测得该酶的分子量为35kD。用PAGEIEF测得其等电点pI为45。酶反应的最适pH为5.8，最适温度为50℃。该酶在pH60～80，50℃以下稳定。金属离子Hg2+和Ag+对酶活性强烈抑制。酶对槐豆胶、羟丙基瓜胶、田菁胶和魔芋粉的Km值分别为38、149、113和24mg/mL，Vmax值分别为245、865、384和198μmol.min-1mg-1。酶水解甘露聚糖为甘露寡糖(不含单糖)。

摘要:以蝉蜕为底物诱导绿僵菌产生分解昆虫外壳蛋白酶。发酵液经超滤、Ultrogel AcA 54凝胶层析、制备IEF电泳，纯化了一种蛋白酶MAP-21，SDS-PAGE电泳后经银染色呈单带。该酶的Mr为27kD左右，pI为76。它的特异识别氨基酸为Arg，其活性可被PMSF和TLCK抑制，表明其活性中心有Ser和His残基。它还可被胰蛋白酶的典型抑制剂Leupeptin、Antipain及STI等所抑制，而胰凝乳蛋白酶抑制剂TPCK和胰凝乳弹性蛋白酶抑制剂TEI对其活性无影响。专一底物和抑制剂特性试验结果表明MAP-21是类胰蛋白酶。此外，该酶还可被EDTA所抑制，表明金属离子为其活性所必需。另外还研究了MAP-21的最适作用温度和pH，以及温度耐受性等特性。

摘要:目前,灵芝多糖的抗肿瘤及免疫活性已得到人们的广泛关注[1]。灵芝子实体多糖和发酵过程中产生的胞内和胞外多糖已被国内外的研究者证实都是有效多糖[2]。因此利用深层发酵来大规模地生产生物活性多糖是目前灵芝开发利用技术的热点。国内对灵芝培养基的组成、培养方法等已?..

摘要:FruA是粘细菌(Myxocoxccusxanthus)发育所必需的转录因子,影响着一系列发育特异性基因的表达。在大肠杆菌中表达了带组氨酸标记的FruA,并用镍离子层析进行快速分离纯化。凝胶阻滞试验提示FruA对靶基因的调控可能需要其它因子的参与。

摘要:提纯了嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ１ 株的铁载体（ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ） ，并对其特性进行了初步分析。Ａｈ Ｊ１ 株的培养上清液经聚酰胺柱层析、双蒸水洗脱、乙酸乙脂沉淀和真空冻干，获得白色粉末。用ＣＡＳ法及Ａｒｎｏｗ 法检测均为阳性，证实为铁载体，含有２ ，３二羟基苯甲酸（２ ，３ＤＨＢ） 功能团，属酚盐类铁载体。高压液相色谱分析表明，此种铁载体仅含甘氨酸、赖氨酸及色氨酸。上述纯化的铁载体，在体外培养条件下能促进产铁载体为弱阳性的Ａｈ Ｎ９ａ 株的生长，且能对抗ＥＤＤＡ 对细菌生长的抑制作用，显示铁载体能促进细菌的增殖，在细菌的感染致病过程中可能起重要作用。