摘要:美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（Photobacterium damselae subsp.damselae，PDD）是一种广泛分布于海洋环境内的重要病原菌，可导致多种海洋生物患病死亡，近年来在我国不同养殖区域内均有发现和报道。[目的] 通过生理代谢表型、毒力基因分布和分子遗传分析，系统比较我国海南地区和环渤海湾不同株系PDD的表型与遗传多样性特征。[方法] 使用选择性培养基测定PDD的蔗糖发酵能力、运动性、溶血性和磷脂酶活性；通过PCR检测质粒pPHDD1复制起始点基因pPHDD1 replication origin和毒力基因dly，hlyApl，hlyAch，plpV；基于toxR基因序列构建系统发育树，分析16株PDD的遗传关系。[结果] 4株PDD蔗糖发酵测试呈阳性，12株PDD蔗糖发酵测试呈阴性。不同株系PDD运动能力存在显著差异，其中环渤海湾分离株Pdd1608、Pdd2009和Pdd1704的运动能力较强。仅有环渤海湾分离株Pdd1608表现为强溶血性、强磷脂酶活性；海南地区分离株Pdd1612和Pdd0912表现为弱溶血性、无磷脂酶活性；其余菌株表现为弱溶血性、弱磷脂酶活性。菌株Pdd1608的毒力基因谱为pPHDD1 replication origin-dly-hlyAp-hlyAch-plpV，其余菌株的毒力基因谱为hlyAch-plpV。系统发育分析揭示不同株系PDD具有高度的遗传多样性。[结论] 流行于海南地区和环渤海湾的PDD可能都由多克隆种群组成，它们具有复杂的表型特征、相似的毒力基因分布和高度的遗传多样性。

摘要:【目的】 研究枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus subtilis subsp. spizizenii) Bspi2104胞外抑菌物质的理化特性及抗菌活性组分。【方法】 选取具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌斯氏亚种Bspi2104菌株和无抗菌作用的枯草芽孢杆菌斯氏亚种BspiL6菌株，结合牛津杯法和代谢组学检测技术对菌株胞外产物的抑菌活性和理化特性及其抗菌活性组分进行研究。【结果】 胞外产物理化稳定性试验表明，胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶和脂肪酶处理对胞外产物的抑菌活性无显著影响；胞外产物经80 ℃和100 ℃处理后丧失抑菌活性；pH 9.0和pH 11.0条件下胞外产物的抑菌活性下降，pH值越大抑菌活性越弱；经过紫外处理的胞外产物与未经紫外处理的胞外产物抑菌活性无明显差异(P>0.05)。60%、70%和80%饱和度下的硫酸铵沉淀产物具有抑菌活性，硫酸铵饱和度为70%时抑菌活性最强；菌株胞外产物进行盐酸沉淀后，分别通过甲醇抽提提取、乙酸乙酯萃取提取和氯仿萃取提取后的产物均有抑菌活性，其中菌株Bspi2104的乙酸乙酯萃取提取产物抑菌效果最好。通过LC-MS/MS检测技术对菌株Bspi2104和BspiL6不同提取方式下枯草芽孢杆菌胞外产物组分进行分析，差异代谢物筛选表明，两株菌的不同提取方式产物中共有的差异代谢物有35种；差异代谢产物主要分属于羧酸及其衍生物、脂肪酸类、有机含氧化合物、有机含氮化合物、甾体及其衍生物、孕烯醇酮脂类、酚类、生物碱及其衍生物、甘油磷脂类、异黄酮类、苯及其取代衍生物等37类物质，包括苦参素、表面活性素B等多种抑菌物质。【结论】 枯草芽孢杆菌斯氏亚种Bspi2104胞外产物的理化稳定性较好，在多种蛋白酶和脂肪酶、pH 1.0−11.0、−20−60 ℃和紫外照射3 h处理下仍然具备较高的抑菌活性。枯草芽孢杆菌斯氏亚种Bspi2104胞外产物的硫酸铵沉淀、盐酸沉淀甲醇抽提、乙酸乙酯萃取和氯仿萃取提取物均有抑菌活性，其中70%硫酸铵沉淀提取物和乙酸乙酯萃取提取物抑菌效果最好，菌株具有多种类型的抑菌活性物质。相关研究结果为芽孢杆菌抑菌活性组分的发现和筛选提供了理论参考，相关代谢产物具有一定的研究前景。

摘要:【目的】探讨凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)工厂化繁育系统内发生细菌性玻化症(shrimp postlarva bacterial vitrified syndrome, BVS)时期可培养微生物的菌群特征以及优势病原菌的遗传多样性。【方法】采用细菌体外培养方法结合基因测序技术对不同育苗阶段的亲虾、受精卵、无节幼体、蚤状幼体、糠虾幼体、仔虾，及其育苗池水和饵料内可培养细菌菌群的组成与结构特征进行研究，并通过多位点序列分析(multilocus sequence analysis, MLSA)方法解析病原菌的遗传多样性。【结果】系统内分离纯化的526株具有典型形态差异和群落优势的细菌分属于4门5纲16目24科38属113种。在纲水平上γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)丰度最高，共453株，占总分离株的86.1%；在属水平上弧菌属(Vibrio)丰度最高，共369株，占总分离株的70.2%；在种水平上，溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)为最优势种，共112株，占总分离株的21.3%，并且分布于整个繁育系统，在饵料中具有最高丰度。多元关联分析表明，随着对虾幼体的发育，饵料对幼体体内可培养细菌的菌群结构影响逐渐增加。对112株潜在溶藻弧菌的MLSA分析表明，其中100株菌株进一步确认为溶藻弧菌。进一步利用MLSA构建系统发育树分析其遗传多样性发现，100株溶藻弧菌分为9个簇，分离自同类样品的菌株广泛分布在不同的簇中。【结论】在BVS发生时期，凡纳滨对虾工厂化繁育系统中具有丰富的可培养微生物种类。对虾幼体发育过程中，饵料对幼体体内可培养细菌的菌群结构具有重要影响。溶藻弧菌为凡纳滨对虾工厂化繁育系统中的优势弧菌，分布于整个繁育系统，且具有丰富的遗传多样性。本研究为解析对虾繁育系统可培养微生物演替规律提供了数据支撑，也为对虾苗期病原防控和健康养殖提供了科学依据。