2011, 51(8):1032-1041.
摘要:摘要: 【目的】建立二联吡啶类抗生素浅蓝霉素的产生菌海洋异壁放线菌Actinoalloteichus sp. WH1-2216-6的遗传操作体系,以便对浅蓝霉素的相关生物合成基因进行体内敲除和基因回补等遗传操作。【方法】以整合型质粒pSET152 为外源DNA,探索和优化了异壁放线菌WH1-2216-6 菌株与大肠杆菌进行接合转移实验的方法和条件,以此为基础,利用PCR-targeting 系统在体外构建了一个浅蓝霉素二羟基苯甲酸甲酯AMP 连接酶基因敲除的cosmid 质粒pCSG2104,并在优化后的