摘要:摘要:【目的】为了研究铜绿假单胞菌全局调控因子RsmA对两个吩嗪(Phenazine)合成基因簇phz1和phz2的调控方式与机制。【方法】采用基因缺失和抗性基因(gentamycin resistance cassette，aacC1)插入相结合的策略构建了rsmA 基因缺失突变株PA-RG;通过构建互补表达载体和过表达载体，进一步确认RsmA 对绿脓菌素的调控作用;采用电转化方法将构建的翻译融合表达载体pMEZ1 (phz1-lacZ)和pMEZ2 (phz2-lacZ)分别导入铜绿假单胞菌突变株PA-RG 和野生株PAO1，采用Miller 法测定融合β-半乳糖苷酶活性。【结果】在GA 培养基中，互补分析和过表达分析表明，RsmA抑制绿脓菌素的合成。此外，pMEZ1在突变株PA-RG中的表达增强，为野生株的2－3倍;而pMEZ2在突变株PA-RG中的表达降低，野生株是突变株的2倍。【结论】由此初步判定，铜绿假单胞菌全局调控因子RsmA对两个不同吩嗪合成基因簇的调控作用具有特异性，在一定程度上RsmA 负调控phz1，正调控phz2。

摘要:摘要:【目的】为了确定铜绿假单胞菌调控因子Pip对两个不同吩嗪合成基因簇(phz1和phz2)的具体调控方式与可能的调控机制。【方法】根据基因比对结果，采用同源重组技术构建Pip 调控因子缺失突变株PA-PG以及克隆pip 基因作互补分析;再以已构建的吩嗪基因簇缺失突变株PA-Z1G和PA-Z2K为受体菌，构建突变株PA-PD-Z1G和PA-PG-Z2K，测定并比较野生株及相关突变株的吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素的合成量，推定Pip对两个不同吩嗪合成基因簇的调控方式。【结果】在GA培养基中，突变株PA-PG的吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素都比野生型明显减少;互补分析显示，突变株PA-PG的吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素都显著提高并恢复到野生株PAO1水平;突变株PA-Z1G的吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素合成量因Pip缺失而显著减少;而突变株PA-Z2K的吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素合成量在Pip缺失后仍保持不变。【结论】初步推定，转录调控因子Pip对铜绿假单胞菌吩嗪合成代谢的确具有促进作用;Pip通过正向调控吩嗪基因簇phz2的合成功能实现对吩嗪合成代谢的调控。