摘要:【背景】前期工作中，从北大仓白酒大曲分离到一株真菌，经形态学和分子生物学方法，将其鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporim) M1，研究发现该菌能产中性蛋白酶。中性蛋白酶是应用于工业化生产的重要酶制剂。由于其作用条件温和、催化速率较高，被广泛应用于食品、医药、皮革、饲料、化工和废弃物处理行业。【目的】为了使该菌蛋白酶应用于相关工业生产，需要对该蛋白酶进行纯化和酶学特性研究。【方法】采用硫酸铵分级分离、疏水和离子交换层析对该菌蛋白酶进行纯化，通过SDS-PAGE测定酶的纯度和分子量，并研究其热稳定性和酸碱适应性。【结果】经各步层析，蛋白酶纯化倍数达26.1，得率为7.9%；经测定纯酶的分子量为62 kD；该酶最适温度为40 °C，最适pH为7.0，属于中性蛋白酶；该酶对酸较敏感，对碱有较强的耐受性；耐热性较强，但酶活性不受乙二胺四乙酸二钠盐抑制。【结论】由于该中性蛋白酶具有较好的耐热性，因此，可作为工业生产上潜在的生物催化剂。

摘要:[背景] 菌株Lechevalieria rhizosphaerae NEAU-A2是一株新的稀有放线菌，其基因组中包含多个与次级代谢产物生物合成相关的基因簇，具有产生丰富代谢产物的潜力。[目的] 对稀有放线菌L. rhizosphaerae NEAU-A2的次级代谢产物进行研究，以期发现结构新颖或生物活性独特的化合物，并建立其遗传操作系统。[方法] 应用硅胶柱色谱和高效液相色谱等方法对菌株NEAU-A2的次级代谢产物进行分离和纯化，整合质谱分析、核磁共振等方法进行结构解析。在对该菌株全基因组测序的基础上，以基因组序列中编码杂合的聚酮合酶-非核糖体肽合成酶（Polyketide Synthase-Nonribosomal Peptide Synthetase，PKS-NRPSs）基因1609为目标基因，利用PCR-Targeting介导的基因置换技术构建重组质粒，通过接合转移的方式导入野生菌株。[结果] 从菌株NEAU-A2中分离鉴定了2个新的吲哚二聚化合物（1，2）和5个已知化合物N-乙酰色胺（3）、4-（（2-（1H-Indol-3-Yl）Ethyl）Amino）-4-Oxobutanoic Acid（4）、Brevianamide F（5）、4S，7R-Germacra-1（10）E，5E-Diene-11-Ol（6）、1H-吡咯-2-羧酸（7）。接合子通过培养2代即可获得双交换突变菌株，PCR分析结果显示PKS-NRPS基因被成功中断。[结论] 从稀有放线菌L. rhizosphaerae NEAU-A2中分离鉴定出7个化合物，并成功建立了该菌的遗传操作系统。

摘要:1,3-丙二醇(1,3-propanediol，1,3-PD)可用于工业合成多种化合物，包括聚酯、聚醚和聚氨酯。发酵法生产1,3-PD具有巨大潜力。本文从代谢途径分析入手，梳理了肺炎克雷伯氏菌厌氧代谢途径的相关酶及催化作用，较详细地综述了其产1,3-PD关键酶的分子改造、基因工程菌株的构建和关键酶基因表达、副产物相关代谢酶基因敲除等方面的最新进展，并展望了其今后的发展前景。