摘要:【目的】从海底沉积物中分离、筛选水霉拮抗放线菌菌株，鉴定目标菌株及其无菌发酵液对水霉生长的抑制效果，并初步分析拮抗活性物质的稳定性。【方法】用稀释涂布法从采集的海底沉积物中分离得到海洋放线菌，以水霉为靶菌，通过平板对峙法在PDA平板上筛选出对水霉有拮抗作用的菌株；利用其发酵液对水霉菌丝和孢子进行初步拮抗效果研究；通过16S rRNA基因序列分析对目标菌株的种属进行初步鉴定。【结果】从分离到的数十株海洋放线菌中筛选到5株水霉拮抗菌，其中拮抗效果最强的为S26菌株，16S rRNA基因序列分析结果显示其为链霉菌，并与紫色链霉菌具有较近的亲缘关系；S26马铃薯葡萄糖液体培养基发酵液在平板抑菌圈实验中，对水霉孢子萌发的抑菌圈直径达32.00 mm±0.81 mm，其5倍浓缩无菌发酵液对水霉菌丝的抑菌圈直径达39.75 mm±0.50 mm；5倍浓缩无菌发酵液抑菌活性的3.125%即能完全抑制水霉孢子的萌发；5倍浓缩液对温度具有较强耐受性，经100 °C高温30 min处理后平板抑菌圈直径为25.50 mm±0.58 mm；经不同pH值处理12 h后，pH 5.0–9.0之间仍保持较好的拮抗活性；在37 °C下蛋白酶处理2 h后实验组与对照组存在显著性差异，但平板抑菌圈直径仍可达33.25 mm以上，推测拮抗物质活性成分由多肽和非多肽类代谢物共同组成。【结论】海洋链霉菌株S26产生的活性物质对病原水霉真菌有较强的抑制作用，并对外界环境变化有较强的适应能力，因而在水霉病的生物防治中具有潜在的应用价值。研究结果同时也显示海洋链霉菌在水产病害生物防治应用领域有较好的发展前景和更广阔的挖掘空间。

摘要:【背景】中国是水产养殖大国，氨氮、亚硝态氮是水体中主要的氮源污染物。水体氨氮超标不仅会损伤水生动物的神经系统和肝肾系统，还会导致体表及内脏充血。亚硝态氮过高会阻碍血液运载氧气能力，导致鱼虾缺氧、免疫力下降，从而引发肠炎、烂鳃，甚至窒息死亡。部分光合细菌有去除水体氨氮、亚硝态氮的能力，且对环境友好无二次污染。【目的】从广东养殖水体分离、纯化、筛选出生物活性好的光合细菌(编号SP3)进行种属鉴定，优化培养条件，检测其去除水体氨氮和亚硝态氮的能力，为养殖水体去除氨氮和亚硝态氮提供目标菌株。【方法】用双层平板法从混合菌液中分离得到光合细菌，通过革兰氏染色、碳源利用试验、对无机电子供体的利用试验以及16S rRNA基因序列分析对目标菌株进行种属鉴定；测定菌株SP3在不同pH、不同浓度NaCl条件下的OD600，优化培养条件；通过测定7 d内SP3菌株在不同浓度氨氮(氯化铵配制)和亚硝态氮(亚硝酸钠配制)中OD600的变化趋势，确定该菌株对不同氮源的利用情况；用纳氏比色法、分光光度法测定SP3菌株降解水体氨氮和亚硝态氮的能力。Genome walking扩增获得亚硝酸盐还原酶基因(nirS)，通过荧光定量PCR研究nirS在氨氮、亚硝态氮去除过程中的表达动态。【结果】筛选出的菌株SP3为革兰氏阴性菌，短杆状；能以醋酸盐、丙酮酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、苹果酸、果糖、葡萄糖作为碳源，不能以乙醇和丙酮作为碳源；能利用硫化钠、硫代硫酸钠、亚硫酸钠作为无机电子供体；16S rRNA基因序列分析表明其与沙氏外硫红螺菌(Ectothiorhodospira shaposhnikovii)序列相似度为99%；菌株SP3适宜pH为6.0?8.5，适宜盐度为0?3%；菌株SP3以铵盐作为氮源时生长状态明显优于亚硝酸盐；以初始菌液浓度8.6×109 cfu/mL、起始氨氮量84.15±0.58 mg/L的条件培养7 d，水体氨氮累计去除量为79.45±0.29 mg/L，氨氮累计去除率达到94.42%；在同样菌浓度和2 mg/L亚硝酸钠的条件下培养5 d，水体亚硝态氮含量低于检测限0.003 mg/L。在菌株SP3去除氨氮、亚硝态氮过程中nirS相对表达量上调。【结论】菌株SP3为沙氏外硫红螺菌(E. shaposhnikovii)，能有效去除水中氨氮和亚硝态氮，具有净化水质作用，在水产养殖和污水处理中有广阔应用前景。