摘要:【背景】猪链球菌(Streptococcus suis，SS)是一种重要的人兽共患病原菌，有35种血清型，其中以猪链球菌2型(SS2)危害最为严重。研究发现，各种血清型SS分泌的溶血素(suilysin，SLY)可能具有较好的免疫保护作用，因此，SLY作为SS基因工程亚单位疫苗的成分具有较大优势。【目的】获得SS2安徽强毒株(AH10-8株)溶血素基因(sly)的表达产物，并对其免疫原性进行测定分析。【方法】根据GenBank数据库中登录号为DQ443533.1的全长sly序列，设计合成一对分别带有BamH I、Xho I酶切位点的特异性引物，利用PCR从AH10-8株中扩增sly基因，构建pET-30a-sly原核表达重组质粒，将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中，进行IPTG诱导表达和His-Tag镍柱纯化蛋白，SDS-PAGE检测SLY，Western blotting鉴定SLY的反应原性；利用昆明鼠和斑马鱼进行SLY免疫攻毒保护试验，间接ELISA方法检测昆明鼠血清IgG抗体效价，观察比较病理组织变化及其免疫保护率。【结果】重组质粒pET-30a-sly在大肠杆菌中实现高效表达，获得大小为60 kD的目的蛋白，与预期大小的SLY分子质量一致，能与SS2阳性血清发生特异性反应。SLY和AH10-8株灭活全菌体3次免疫昆明鼠后的血清IgG抗体效价分别为1:6 400、1:204 800 (以AH10-8株全菌体的超声裂解物为包被抗原)和1:102 400、1:51 200 (以SLY为包被抗原)；SLY和AH10-8株灭活全菌体对昆明鼠和斑马鱼的免疫保护率分别为40%、80%和84%、92%；病理组织变化与攻毒对照组之间差异明显。【结论】成功表达的SLY具有良好的反应原性和免疫原性，可诱导机体产生保护性免疫反应，有望成为研制SS2新型疫苗的候选成分。