家兔精子膜蛋白rSP10在大肠杆菌中的高效表达及其抗血清的制备

摘要:

为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性，将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中，N端具有His6肽的融合蛋白re-rSP10得到高效表达，表达产物达细菌总蛋白的67%。经DEAE柱层析纯化表达产物,re-rSP10，产量约为50mg/mL培养物。Western实验结果表明，精子膜蛋白多克隆抗体能识别re-rsp10，说明大肠杆菌表达的re-rSP10具有免疫原性。用纯化的re-rSP10免疫雌性兔，得到re-rSP10专一性多克隆抗血清。将re-rSP10专一性多克隆抗血清加入获能精子中，发现SP10专一性多克隆抗血清严重影响获能精子的运动并且表现为剂量依赖性，但获能精子凝集现象并不明显。

关键词:家兔，精子膜蛋白，rSP10，表达，抗血清

Abstract:

Key words:家兔，精子膜蛋白，rSP10，表达，抗血清