建立稳定表达人RANTES基因的夏枯草细胞克隆

摘要:

为了在中药细胞中表达人源有用基因，以增强其特异药理活性，将克隆自人外周血淋巴细胞（PBL）mRNA的RANTES基因经Ti质粒衍生的中间表达载体pROKII导入携带pAL4404质粒的根癌农杆菌LBA4404菌株中，并采用叶盘共培养法转化离体培养夏枯草细胞，经Southern杂交确认RANTES基因在转化细胞基因组中的整合，用RT-PCR扩增、Western印迹杂交和酶联免疫吸附测定（ELISA）分析转化细胞中RANTES基因的表达，以PBL的过氧化物酶活性作为重组RANTES对细胞趋化性诱导的检测指标。结果表明，RANTES基因已在转基因夏枯草细胞中整合，并已形成稳定表达RANTES基因的细胞克隆，为进一步培育具有特异药理活性的转基因夏枯草植株打下了基础。

关键词:RANTES， 转基因夏枯草， 基因表达， 趋化活性

Abstract:

Key words:RANTES， 转基因夏枯草， 基因表达， 趋化活性