抗HIV-1重组导向毒素SL120在毕赤酵母中的表达及其活性检测

摘要:

以pPIC9K为载体,构建抗HIV 1gp12 0单链抗体scFv12 0与葡萄球菌肠毒素A(StaphylococcalenterotoxinA ,SEA)融合基因表达质粒,线性化、电转化法整合入巴斯德毕赤酵母菌,经表型鉴定、PCR分析和G418筛选得到Muts型多拷贝整合菌,甲醇诱导培养可分泌表达5 7kD的预期大小蛋白—重组导向毒素SL120 ,表达量达50.1mg/L。通过单链抗体亲和力测定,表明蛋白SEA和scFv120的构象有微弱的相互影响,但此重组导向毒素仍可高效介导CTLs杀伤HIV-1靶细胞。

关键词:HIV-1; gp120; 单链抗体; 金黄色葡萄菌外毒素A; 分泌表达; 毕赤酵母;

Abstract:

Key words:HIV-1; gp120; 单链抗体; 金黄色葡萄菌外毒素A; 分泌表达; 毕赤酵母;