人溶菌酶基因的合成和克隆

摘要:

用固相亚磷酰胺法合成了人溶菌酶的全基因，全长为409bp，它包括了编码人溶菌酶的结梅基因，起始密码于ATG，终止密码子TAA、TGA，以及两端的BamHI和SphI的识别顺序。整个基因分成24个寡聚核苷酸片段进行合成，每个片段长度分别为26至38个核苷酸．然后用两种方法酶促连接成完整的人溶菌酶基因。基因克隆到M13载体上。用点杂交和限制酶酶切分析确定阳性克隆株。用双脱氧链终止法进行序列分析，证实所合成的人溶菌酶基因序列与设计的完全一致。

关键词:人溶菌酶，DNA合成，基因克隆

Abstract:

Key words:人溶菌酶，DNA合成，基因克隆